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目的 探讨人转化生长因子β1(TGF-β1)干预构建的人支气管上皮细胞16 HBE上皮-间质转化(EMT)模型中lncRNA和miRNA的表达情况.方法 体外培养16 HBE细胞,设立对照组和处理组.处理组以TGF-β1诱导细胞构建EMT细胞模型,对照组加入等量RPMI基础培养液.分别于TGF-β1处理细胞后24、48、72 h使用倒置显微镜观察两组细胞形态及分布.当处理组细胞开始出现明显梭形改变时,采用RNA分离、逆转录以及实时荧光定量PCR(RT-qPCR)方法检测两组细胞中lncRNA和miRNA相对表达量.结果 经TGF-β1处理细胞48 h后,处理组细胞梭形改变明显,细胞间隙增大,显示E MT模型构建成功.同时在该时间点,两组细胞中TBILA、NKILA、LNCRNA-ATB、HOTAIR、NEAT1、miR-125b-5p、miR-21-3p、miR-21-5p、miR-27a-3p、miR-27a-5p、miR-141-3p、miR-200c-3p、miR-17-5p、miR-34a-5p的相对表达量比较差异均具有显著意义(t=-16.353~6.460,P<0.05).结论 TGF-β1干预能够成功构建EMT细胞模型,该细胞模型中的细胞与正常细胞相比,多个lncRNA和miRNA表达具有显著差异.上述基因可能参与了EMT或气道重塑的形成和发展,或许为这些疾病的防治提供分子理论支持.

作者:陈华培;杨召川;李蕾;曲政海

来源:精准医学杂志 2023 年 38卷 1期

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作者:
陈华培;杨召川;李蕾;曲政海
来源:
精准医学杂志 2023 年 38卷 1期
标签:
RNA,长链非编码 微RNAs 转化生长因子β1 上皮-间质转化 上皮细胞 气道重塑 纤维化
目的 探讨人转化生长因子β1(TGF-β1)干预构建的人支气管上皮细胞16 HBE上皮-间质转化(EMT)模型中lncRNA和miRNA的表达情况.方法 体外培养16 HBE细胞,设立对照组和处理组.处理组以TGF-β1诱导细胞构建EMT细胞模型,对照组加入等量RPMI基础培养液.分别于TGF-β1处理细胞后24、48、72 h使用倒置显微镜观察两组细胞形态及分布.当处理组细胞开始出现明显梭形改变时,采用RNA分离、逆转录以及实时荧光定量PCR(RT-qPCR)方法检测两组细胞中lncRNA和miRNA相对表达量.结果 经TGF-β1处理细胞48 h后,处理组细胞梭形改变明显,细胞间隙增大,显示E MT模型构建成功.同时在该时间点,两组细胞中TBILA、NKILA、LNCRNA-ATB、HOTAIR、NEAT1、miR-125b-5p、miR-21-3p、miR-21-5p、miR-27a-3p、miR-27a-5p、miR-141-3p、miR-200c-3p、miR-17-5p、miR-34a-5p的相对表达量比较差异均具有显著意义(t=-16.353~6.460,P<0.05).结论 TGF-β1干预能够成功构建EMT细胞模型,该细胞模型中的细胞与正常细胞相比,多个lncRNA和miRNA表达具有显著差异.上述基因可能参与了EMT或气道重塑的形成和发展,或许为这些疾病的防治提供分子理论支持.