[目的]松墨天牛Monochamus alternatus是我国南方松林中的重要蛀干害虫, 也是林业检疫性病害——松材线虫病的主要媒介昆虫, 其分布范围较广, 对温度的适应性强, 本研究旨在初步探讨松墨天牛对温度胁迫适应性的分子机制.[方法]采用RT-PCR与RACE技术克隆松墨天牛小热激蛋白 (small heat shock protein, sHSP) 基因的全长cDNA, 结合生物信息学方法分析小热激蛋白的结构特征;利用qPCR技术测定该基因在松墨天牛不同发育阶段、4龄幼虫不同组织及不同低温和高温胁迫下4龄幼虫中的表达谱, 并用geNorm, NormFinder和BestKeeper软件对不同温度下内参基因稳定性进行评价.[结果]获得松墨天牛sHSP基因的cDNA全长序列, 命名为MaltHSP21.20 (GenBank登录号:MH091811), 全长为871 bp, 编码187个氨基酸, 信号肽预测表明其N末端含有18个氨基酸的信号肽, 成熟蛋白预测分子质量为21.20 kD, 等电点为8.65.结构域预测符合小热激蛋白家族的特征, 共含有10个β折叠片, 在α结构域内含有7个β折叠片.进化树分析表明该蛋白氨基酸序列与光肩星天牛Anoplophora glabripennis的sHSP有较高的同源性.不同软件分析得到最稳定的内参基因存在差异, 结合3种方法评价得出RPL10最为稳定.MaltHSP21.20在不同发育阶段的松墨天牛体内均有表达, 滞
作者:李慧;何玄玉;陶蓉;陈宏建;龚馨玥;李寿银;郝德君
来源:昆虫学报 2018 年 61卷 7期