目的 采用干扰RNA技术(small interfering RNA,siRNA)抑制SKBR-3,即HER-2(+++),EGFR(+++)乳腺癌细胞EGFR的表达,研究EGFR受抑制后HER-2过表达细胞对X线敏感性的变化.方法 质粒转染及鉴定:将细胞随机分为实验组、阴性对照组和空白组,重组质粒EGFR-siRNA和Neg-siRNA分别被转染入实验组及阴性对照组；Western blot检测各组细胞EGFR的表达水平；6MV射线照射4 Gy后0,24 h,48 h收集细胞,流式细胞术检测细胞凋亡率；克隆形成实验检测细胞D0,SF2和α等值.结果 质粒转染SKBR-3细胞,Western分析表明转染EGFR-siRNA的阳性细胞株在蛋白质水平受到明显抑制；X线照射24 h及48 h后,EGFR表达受抑制细胞凋亡率均高于转染阴性质粒组和空白对照组(P分别为0.045及0.039)；EGFR受抑制的细胞D0值和SF2值分别为1.218和0.376,α值为0.335.结论 运用RNAi技术可以有效抑制EGFR的表达从而提高SKBR-3细胞对X线的放射敏感性,EGFR是一个较理想的肿瘤分子治疗靶点.
作者：赵春芳；王晓莉；常莉
来源：昆明医科大学学报 2013 年 34卷 1期
