目的:探讨脆性基因 W W OX 调控胆囊癌细胞的增殖效应及其机制.方法将前期成功构建的pcDNA3.0-WWOX 重组质粒按脂质体介导转染GBC-SD 细胞,同时转染空载体、脂质体为阴性对照及GBC-SD 为空白对照.转染48 h后采用倒置显微镜观察各组胆囊癌细胞形态学变化,MTT、BrdU检测胆囊癌细胞增殖水平,流式细胞仪检测细胞增值周期的变化.结果倒置显微镜观察pcDNA3.0-WWOX 组GBC-SD 细胞数量明显减少,悬浮细胞及细胞碎片增加,而Vector control、NC、Mock组细胞呈正常增殖状态.MTT检测显示pcDNA3.0-WWOX组GBC-SD细胞增殖于24 h、48 h、72 h、96 h、120 h低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),并随时间推移, pcDNA3.0-WWOX 组细胞增殖活性抑制明显.BrdU 检测显示 pcDNA3.0-WWOX 组细胞增殖率为(0.44±0.03),对照组分别为(0.78±0.02),(0.81±0.01),(0.85±0.01),表明pcD N A 3.0-WWOX组细胞增殖活性较对照组降低,差异有统计学意义(P<0.05).细胞周期检测发现pcDNA3.0-WWOX组G0/G1期细胞增多,G2/M期和S期细胞减少,细胞凋亡率较对照组(Vector control,NC,Mock)明显增高、增殖指数下降(P<0.05),而对照组间差异无统计学意义( P>0.05).结论过表达WWOX基因体外可有效抑制胆囊癌
作者:魏东;张小文;李越华;施智甜;王琳;吴雪松;邹浩
来源:昆明医科大学学报 2016 年 37卷 5期