目的 探索宫颈癌细胞中HLA-G表达差异对NK细胞表面活化性受体的影响.方法 实时定量PCR(real-timePCR)及免疫印迹法(Western-Blot WB)检测宫颈癌细胞及正常宫颈细胞中HLA-G的表达差异.利用慢病毒载体构建HLA-G稳定下调的宫颈癌细胞株,并与NK细胞共培养,CCK8法检测共培养后宫颈癌细胞增殖能力的变化,流式细胞术检测宫颈癌细胞凋亡水平.同时,流式细胞术检测共培养后NK细胞表面活化性受体NKG2D、NKP30的表达水平及颗粒素(Granzyme)、穿孔酶(Perforin)的表达差异.结果 RT-PCR及WB法检测结果显示:与H8细胞相比,C33a、SiHa细胞中HLA-G的表达显著升高(P＜0.05).CCK8法检测结果显示:HLA-G下调后,C33a及SiHa细胞与NK细胞共培养,C33a及SiHa细胞的增殖能力显著减弱(P＜0.05),同时,C33a及SiHa细胞的凋亡水平显著升高(P＜0.05).流式细胞术检测结果显示:C33a及SiHa细胞HLA-G下调后,与其共培养的NK表面NKG2D表达显著升高(P＜0.05),与C33a共培养的NK细胞表面NKP30及Granzyme、Perforin表达显著升高(P＜0.05),与SiHa共培养的NK细胞表面NKP30及Granzyme、Perforin表达存在升高趋势,但差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 HLA-G在宫颈癌细胞中高表达,HLA-G表达升高可促进活化性受体的表达,增强NK细胞对宫颈癌细胞的杀伤作用.

作者：刘倩；哈提拉·吐尔逊；阿仙姑·哈斯木

来源：昆明医科大学学报 2022 年 43卷 7期