目的:探讨miR-149通过靶向调节基因对口腔鳞癌细胞生长和侵袭的影响.方法:以实验室过微阵列芯片技术筛选出的miR-149作为本实验研究对象,通过靶基因预测软件,选定基质金属蛋白酶-9(MMP-9)为其靶基因,利用实时定量PCR(RT-PCR)检测口腔鳞癌和癌旁组织中miR-149和MMP-9 mRNA的表达水平. 瞬时转染miR-149 mimics、miR-149 mimics control、MMP-9siRNA和MMP-9 siRNA阴性对照,通过PT-PCR及Western blotting 检测口腔鳞癌KB细胞系中miR-149与MMP-9的关系.运用平板克隆形成和Transwell侵袭实验检测MMP-9对口腔鳞癌KB细胞生长和侵袭的影响. 结果:在口腔鳞癌中miR-149的表达明显低于癌旁组织(P<0.01),MMP-9 mRNA的情况则相反(P<0.01). 瞬时转染后应用RT-PCR及Western blotting 检测提示,miR-149与MMP-9表达成反比,差异具有统计学意义(P<0.05),说明二者之间有靶向调节关系. 与对照组细胞相比,转染MMP-9 siRNA的口腔鳞癌KB细胞克隆数目减少(P<0.05),发生侵袭的细胞减少(P<0.05). 结论:miR-149通过靶向调节MMP-9的表达,抑制口腔鳞癌细胞的生长和侵袭,发挥着抑癌基因的作用,可望作为口腔鳞癌分子治疗的有效靶点.
作者:裴浩
来源:口腔颌面外科杂志 2015 年 25卷 5期