目的 研究小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)抑制人牙周膜成纤维细胞(human periodontal ligament fibroblast cell,HPLF)中雌激素受体β(estrogen receptor β,ERβ)后,对17β-雌二醇( E2 )诱导的成骨能力的影响.方法 设计并合成针对ERβ基因siRNA的寡核苷酸序列,插入载体形成重组载体.重组载体经测序鉴定后,以脂质体法转染至HPLF细胞中,蛋白质印迹法及RT-PCR法检测转染前后ERβ的表达情况.鉴定后用1×10-7 mol/L的17β- E2干预经ERβ siRNA转染的HPLF细胞和未经ERβ siRNA转染的HPLF细胞,测定细胞的碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性和骨钙素(osteocalcin,OCN)含量.结果 测序鉴定重组质粒后,蛋白质印迹法及RT-PCR结果显示ERβ siRNA载体可特异地抑制HPLF细胞中ERβ的表达.经雌激素干预后,HPLF细胞ALP活性和OCN含量高于对照组(P<0.01),但ERβ siRNA载体稳定转染的HPLF细胞ALP活性和OCN含量与对照组相比没有显著性差异.结论 雌激素可能通过ERβ亚基促进人牙周膜成纤维细胞的骨向分化能力.
作者：梁莉；周威；余继锋；温莉莎；丁寅
来源：口腔医学 2010 年 30卷 9期
