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目的 研究一种高效安全的人诱导性多潜能干细胞(Induced pluripotent stem cells,iPSCs)重编程新体系,为牙源性组织再生提供安全的干细胞来源.方法 体外培养人根尖乳头干细胞(Stem cells from apical papilla,SCAP),Simplicon RNA复制子为载体,人重组玻连蛋白作为底物,将人SCAP重编程为iPSCs.免疫荧光染色检测iPSCs特异性标记物的表达,畸胎瘤形成实验检测iPSCs分化能力,RT-PCR确认其外源性基因序列的沉默.计算人SCAP-iPSCs的重编程效率.结果 人SCAP-iPSCs具备典型的ES样克隆形态,Oct4、Nanog、Sox2、SSEA-4均为染色阳性.iPSCs植入SCID小鼠体内6周形成畸胎瘤,HE染色显示包含所有三胚层来源组织,RT-PCR显示人SCAP-iPSCs特异性表达干细胞标记物,不再表达外源性基因序列.重编程效率为0.17% ~ 0.20%.结论 结果得到的人SCAP-iPSCs安全性能和诱导效率较高,是理想的牙源性组织再生的干细胞来源.

作者:谭小兵;徐静舒;郭宇;肖艳;戴青原

来源:口腔医学 2017 年 37卷 8期

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作者:
谭小兵;徐静舒;郭宇;肖艳;戴青原
来源:
口腔医学 2017 年 37卷 8期
标签:
人根尖乳头干细胞 RNA 重编程 诱导性多潜能干细胞 human stem cells from apical papilla RNA reprogramming induced pluripotent stem cells
目的 研究一种高效安全的人诱导性多潜能干细胞(Induced pluripotent stem cells,iPSCs)重编程新体系,为牙源性组织再生提供安全的干细胞来源.方法 体外培养人根尖乳头干细胞(Stem cells from apical papilla,SCAP),Simplicon RNA复制子为载体,人重组玻连蛋白作为底物,将人SCAP重编程为iPSCs.免疫荧光染色检测iPSCs特异性标记物的表达,畸胎瘤形成实验检测iPSCs分化能力,RT-PCR确认其外源性基因序列的沉默.计算人SCAP-iPSCs的重编程效率.结果 人SCAP-iPSCs具备典型的ES样克隆形态,Oct4、Nanog、Sox2、SSEA-4均为染色阳性.iPSCs植入SCID小鼠体内6周形成畸胎瘤,HE染色显示包含所有三胚层来源组织,RT-PCR显示人SCAP-iPSCs特异性表达干细胞标记物,不再表达外源性基因序列.重编程效率为0.17% ~ 0.20%.结论 结果得到的人SCAP-iPSCs安全性能和诱导效率较高,是理想的牙源性组织再生的干细胞来源.