目的 探究小檗碱对结核分枝杆菌抗原持续刺激致T细胞耗竭的影响.方法 应用结核抗原持续刺激小鼠模拟临床结核分枝杆菌慢性感染病理过程:卡介苗感染C57BL/6小鼠1周后,使用结核抗原ESAT6-CFP10(EC)和Mtb10.4-HspX(MH)持续刺激4次,每次间隔1周,建立T细胞耗竭模型.利用该模型进行干预治疗:结核抗原刺激期间每天给予不同剂量小檗碱灌胃治疗,末次抗原刺激后1周,流式细胞术检测抗原特异性T细胞分泌γ干扰素的水平和脾脏CD4+和CD8+T淋巴细胞表面抑制性受体PD-1的表达;ELISA检测血清中γ干扰素的水平;生化试剂盒检测脾脏淋巴细胞糖酵解代谢产物丙酮酸和乳酸的浓度;小檗碱体外作用于Jurkat T细胞后检测丙酮酸和乳酸的浓度.结果 结核抗原持续刺激致抗原特异性T细胞分泌γ干扰素的水平降低(P＜0.05),CD4+和CD8+T细胞表达PD-1增多(P＜0.05),提示发生T细胞耗竭.不同剂量的小檗碱治疗后,减弱了T细胞的持续活化,血清γ干扰素水平降低(P＜0.01),CD4+和CD8+T细胞PD-1表达减少(P＜0.05).体外实验表明小檗碱抑制Jurkat T细胞的糖酵解(P＜0.01).结论 结核抗原持续刺激诱导T细胞耗竭,而小檗碱治疗可抑制T细胞的糖酵解,调节T细胞活化,预防T细胞耗竭.
作者：张丹；马岩林；李菲；祝秉东
来源：兰州大学学报（医学版） 2023 年 49卷 5期
