目的:探讨紫杉醇诱导筛选的喉癌Hep-2耐药细胞的多药耐药特性,为逆转喉癌的多药耐药提供理论依据.方法:以浓度逐渐递增法诱导筛选喉癌Hep-2细胞的耐药细胞株Hep-2T,比较2种细胞的形态和倍增时间.以ATP酶检测法确定细胞的IC50和细胞的耐药倍数.流式细胞仪检测2种细胞的周期分布情况、细胞凋亡以及2种细胞内的罗丹明聚集情况.以实时定量RT-PCR法检测MDR1和MRP1基因,Western-botting法检测相应的蛋白表达情况.结果:耐药细胞株的耐药倍数是非耐药株的104倍.耐药株对多柔吡星、吉西它宾、5-Fu及顺铂的耐药倍数分别是非耐药株的46.78,1.95,2.50和1.05倍.与非耐药株比,耐药细胞G0/G1期的细胞较后者升高(P＜0.05),而G2/M和S期细胞则较后者明显降低(P＜0.05).当作用于Hep-2的IC50浓度时,Hep-2细胞的凋亡细胞数较Hep-2T明显高.罗丹明染色显示,Hep-2细胞内的罗丹明较Hep-2T明显增高.Hep-2T细胞MDR1/GAPDH表达在基因和蛋白水平明显高于Hep-2细胞.MRP1/GAPDH在基因和蛋白水平的表达前者亦高于后者,但增高程度不如MDR1/GAPDH明显.结论:在寻找逆转喉癌多药耐药的方法时,应着重于MDR1/P-gp,当应用化疗药时,应考虑非P-gp作用底物的药物.并选择应用周期特异性作用的药物.
作者：李莉；董频；万夷；徐成志；陈黎
来源：临床耳鼻咽喉头颈外科杂志 2007 年 21卷 18期
