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目的:探讨含鸡贫血病病毒(CAV)凋亡素(Apoptin)基因的重组禽痘病毒vFVApoptin诱导人喉癌细胞Hep-2凋亡的作用及其作用方式.方法:用vFVApoptin感染体外培养的人喉癌细胞Hep-2,运用MTT染色法检测重组质粒对肿瘤细胞的抑制作用;并运用流式细胞仪检测肿瘤细胞线粒体跨膜电位(ΔΨm)和细胞内活性氧(ROS)水平变化情况;通过免疫印迹检测细胞色素c(Cyto c)释放;应用底物显色法检测Caspase-3/9活性.结果:vFVApoptin感染可明显抑制Hep-2肿瘤细胞,并具有下调肿瘤细胞ΔΨm,上调其ROS水平,促进Cyto c释放和激活Caspase-3/9的功能.结论:vFVApoptin通过上调Hep-2肿瘤细胞内线粒体ROS产生,造成Cyto c的释放,激活Caspase-9,进而激活Caspase-3等下游凋亡因子,最终通过线粒体途径诱导细胞凋亡抑制Hep-2肿瘤细胞.

作者:管国芳;金宁一;李霄;孙丽丽;金春顺;娄玮;史平;郝延茹

来源:临床耳鼻咽喉头颈外科杂志 2009 年 23卷 6期

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作者:
管国芳;金宁一;李霄;孙丽丽;金春顺;娄玮;史平;郝延茹
来源:
临床耳鼻咽喉头颈外科杂志 2009 年 23卷 6期
标签:
禽痘病毒 凋亡素基因 人喉癌细胞Hep-2 细胞凋亡
目的:探讨含鸡贫血病病毒(CAV)凋亡素(Apoptin)基因的重组禽痘病毒vFVApoptin诱导人喉癌细胞Hep-2凋亡的作用及其作用方式.方法:用vFVApoptin感染体外培养的人喉癌细胞Hep-2,运用MTT染色法检测重组质粒对肿瘤细胞的抑制作用;并运用流式细胞仪检测肿瘤细胞线粒体跨膜电位(ΔΨm)和细胞内活性氧(ROS)水平变化情况;通过免疫印迹检测细胞色素c(Cyto c)释放;应用底物显色法检测Caspase-3/9活性.结果:vFVApoptin感染可明显抑制Hep-2肿瘤细胞,并具有下调肿瘤细胞ΔΨm,上调其ROS水平,促进Cyto c释放和激活Caspase-3/9的功能.结论:vFVApoptin通过上调Hep-2肿瘤细胞内线粒体ROS产生,造成Cyto c的释放,激活Caspase-9,进而激活Caspase-3等下游凋亡因子,最终通过线粒体途径诱导细胞凋亡抑制Hep-2肿瘤细胞.