目的 探究长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)LINC00628及其潜在靶基因mi-croRNA-145(miR-145)对肺腺癌细胞吉非替尼抵抗的影响.方法 收集54例肺腺癌患者的肿瘤及癌旁组织.以人肺腺癌细胞系PC9为体外模型构建吉非替尼抵抗细胞系(Gefitinib resistance,GR组)及相应的对照细胞系(Control组),慢病毒转染随机对照干扰载体及LINC00628小干扰RNA(small interference LINC00628,siL-INC00628)载体于GR组细胞中作为干扰对照细胞系(siControl组)及干扰细胞系(siLINC组),转染空白载体、LINC00628过表达载体及miR-145过表达载体于GR细胞中作为空白细胞系(Blank组)、过表达细胞系(miR-145组)及回复组细胞系(Rescue组);实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测LINC00628、miR-145、c-Myc及AKT1 mRNA表达水平,Western Blot实验检测c-Myc及AKT1蛋白表达水平,CCK-8实验检测细胞吉非替尼的半抑制浓度(50%inhibitory concentration,IC50),荧光素酶报告基因实验验证LINC00628与miR-145的结合作用.结果 相比癌旁组织,LINC00628在肺腺癌中表达显著升高,且与患者预后不良相关;体外实验中,相比Control组,GR组细胞吉非替尼IC50显著增高,LINC00628、AKT1及AKT1表达显著上调,miR-145表达显著降低;相比siControl组,siLINC组细胞吉
作者:刘晨阳;张成;杨婕;孙韬
来源:临床肺科杂志 2021 年 26卷 3期