目的 利用D-氨基半乳糖(D-GalN)/脂多糖(LPS)诱导的小鼠急性肝损伤模型研究细胞自噬在急性肝损伤中的作用及机制.方法 以C57BL/6小鼠为研究对象,腹腔注射D-GalN/LPS建立小鼠急性肝损伤模型.动物实验分组:对照组、D-GalN/LPS组、雷帕霉素+D-GalN/LPS组、三甲基腺嘌呤(3-MA)+D-GaIN/LPS组、Atg7 siRNA+D-GaIN/LPS组.观察不同分组中小鼠的生存情况,观察肝组织病理变化评价肝损伤情况,全自动生化分析仪检测血清ALT、AST水平,实时荧光定量PCR检测肝组织中TNFα和IL-6基因表达,荧光显微镜观察肝组织中肝细胞凋亡情况.多样本组间比较采用One-way ANOVA分析,进一步两两比较,方差齐时采用LSD-t检验,方差不齐时采用Games-Howell法.结果 与D-GalN/LPS组相比,应用自噬激活剂雷帕霉素干预后,小鼠生存率明显升高(80% vs 40%),肝脏出血、炎症和坏死明显减轻,肝细胞凋亡明显减少,血清ALT、AST水平明显降低[ALT:(427.4±195.5)U/L vs(977.7±247.3) U/L,P=0.002;AST:(378.2±169.7) U/L vs(1100.0 ±438.0) U/L,P=0.004],肝组织中炎症因子TNFα和IL-6 mRNA表达水平明显降低[TNFα mRNA:0.288 ±0.010 vs 1.136 ±0.267,P=0.003;IL-6mRNA:0.272 ±0.061 vs 0.869±0.317,P=0.010];应用自噬抑制剂3-MA和Atg7 siRNA干预后,
作者:时红波;时红林;张向颖;陈德喜;段钟平;任锋
来源:临床肝胆病杂志 2017 年 33卷 2期