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目的 探讨干扰Sema4D基因的表达对胰腺癌细胞生物学的影响.方法 设计合成Sema4D-siRNA,转染到人胰腺癌细胞系中,将实验分为3组,转染siRNA组、阴性对照组(即转染非特异性对照组)、空白对照组(未经任何处理的胰腺癌细胞).转染48 h后利用RT-qPCR检测转染前后Sema4D mRNA表达的变化,转染72 h后利用Western-Blot的方法检测转染前后Sema4D蛋白表达的变化;采用四甲基偶氮唑蓝显色法观察转染后细胞生长变化;Transwell小室侵袭试验检测转染后肿瘤细胞侵袭性的改变;采用流式细胞技术检测肿瘤细胞凋亡的变化.计量资料多组间比较采用单因素方差分析比较,进一步两两比较采用LSD-t检验法.结果 转染Sema4D-siRNA 48 h后,转染siRNA组Sema4D mRNA的表达明显低于阴性对照组和空白对照组,3组比较差异有统计学意义(F=421.990,P<0.001).转染Sema4D-siRNA 72 h后,转染siRNA组Sema4D蛋白明显低于阴性对照组和空白对照组,3组间比较差异有统计学意义(F=27.074,P=0.002 3).转染siRNA组48、72、96 h的细胞生长速度明显低于阴性对照组和空白对照组,3组间比较差异均有统计学意义(F值分别为15.314、62.255、223.493,P值分别为0.004、<0.001、<0.001).转染siRNA组穿膜细胞个数明显低于阴性对照组和空白对照组,3组间比较差异有统计学意

作者:侯丽艳;贾如江;任利兵;杨庚武

来源:临床肝胆病杂志 2018 年 34卷 2期

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作者:
侯丽艳;贾如江;任利兵;杨庚武
来源:
临床肝胆病杂志 2018 年 34卷 2期
标签:
胰腺肿瘤 细胞增殖 细胞凋亡 肿瘤侵润 RNA干扰 pancreatic neoplasms cell proliferation apoptosis neoplasm invasiveness RNA interference
目的 探讨干扰Sema4D基因的表达对胰腺癌细胞生物学的影响.方法 设计合成Sema4D-siRNA,转染到人胰腺癌细胞系中,将实验分为3组,转染siRNA组、阴性对照组(即转染非特异性对照组)、空白对照组(未经任何处理的胰腺癌细胞).转染48 h后利用RT-qPCR检测转染前后Sema4D mRNA表达的变化,转染72 h后利用Western-Blot的方法检测转染前后Sema4D蛋白表达的变化;采用四甲基偶氮唑蓝显色法观察转染后细胞生长变化;Transwell小室侵袭试验检测转染后肿瘤细胞侵袭性的改变;采用流式细胞技术检测肿瘤细胞凋亡的变化.计量资料多组间比较采用单因素方差分析比较,进一步两两比较采用LSD-t检验法.结果 转染Sema4D-siRNA 48 h后,转染siRNA组Sema4D mRNA的表达明显低于阴性对照组和空白对照组,3组比较差异有统计学意义(F=421.990,P<0.001).转染Sema4D-siRNA 72 h后,转染siRNA组Sema4D蛋白明显低于阴性对照组和空白对照组,3组间比较差异有统计学意义(F=27.074,P=0.002 3).转染siRNA组48、72、96 h的细胞生长速度明显低于阴性对照组和空白对照组,3组间比较差异均有统计学意义(F值分别为15.314、62.255、223.493,P值分别为0.004、<0.001、<0.001).转染siRNA组穿膜细胞个数明显低于阴性对照组和空白对照组,3组间比较差异有统计学意