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目的 明确弹性蛋白在四氯化碳(CCl4)小鼠肝纤维化模型中的表达特点,初步探索弹性蛋白沉积的相关分子机制.方法 建立CCl4诱导的小鼠肝纤维化形成模型,通过Western Blot、可溶性蛋白及维多利亚蓝染色检测纤维化早期(CCl4注射4周)和进展期(CCl4注射8周)弹性蛋白的变化,同时以橄榄油做为健康对照组;其次,建立纤维化自发逆转模型,通过LC-MS/MS检测不同逆转时间(逆转0周、逆转4周、逆转8周、逆转12周)血清蛋白组学的变化,寻找潜在的与弹性蛋白沉积相关分子,并通过qPCR进行验证.计量资料多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用Tukey检验.结果 弹性蛋白的相对表达量在早期纤维化组和进展期纤维化组分别为0.82±0.05、1.59±0.58,与健康对照组(1.00±0.11)相比,进展期纤维化组显著上升(P<0.05).对不可溶性弹性蛋白的检测发现,与健康对照组(207.9±34.7μg/10 mg)相比,早期纤维化组(213.5±26.7μg/10 mg)无明显变化(P>0.05),而进展期组显著升高[(352.0±57.0)μg/10 mg,P<0.05].肝组织弹性蛋白染色发现,与健康对照组(1.03±0.14)相比,弹性蛋白阳性面积早期纤维化组(2.08±0.16)和进展期纤维化组(4.39±0.51)均显著增加(P值均<0.05).进一步检测了弹性蛋白酶12的基因表达,与健康对照组(1.30±0.10)相比,弹

作者:杨爱婷;严旭禛;赵文姗;李为雨;陈巍;尤红

来源:临床肝胆病杂志 2020 年 36卷 7期

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作者:
杨爱婷;严旭禛;赵文姗;李为雨;陈巍;尤红
来源:
临床肝胆病杂志 2020 年 36卷 7期
标签:
肝硬化 弹性蛋白 氨基酸氧化还原酶类 小鼠
目的 明确弹性蛋白在四氯化碳(CCl4)小鼠肝纤维化模型中的表达特点,初步探索弹性蛋白沉积的相关分子机制.方法 建立CCl4诱导的小鼠肝纤维化形成模型,通过Western Blot、可溶性蛋白及维多利亚蓝染色检测纤维化早期(CCl4注射4周)和进展期(CCl4注射8周)弹性蛋白的变化,同时以橄榄油做为健康对照组;其次,建立纤维化自发逆转模型,通过LC-MS/MS检测不同逆转时间(逆转0周、逆转4周、逆转8周、逆转12周)血清蛋白组学的变化,寻找潜在的与弹性蛋白沉积相关分子,并通过qPCR进行验证.计量资料多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用Tukey检验.结果 弹性蛋白的相对表达量在早期纤维化组和进展期纤维化组分别为0.82±0.05、1.59±0.58,与健康对照组(1.00±0.11)相比,进展期纤维化组显著上升(P<0.05).对不可溶性弹性蛋白的检测发现,与健康对照组(207.9±34.7μg/10 mg)相比,早期纤维化组(213.5±26.7μg/10 mg)无明显变化(P>0.05),而进展期组显著升高[(352.0±57.0)μg/10 mg,P<0.05].肝组织弹性蛋白染色发现,与健康对照组(1.03±0.14)相比,弹性蛋白阳性面积早期纤维化组(2.08±0.16)和进展期纤维化组(4.39±0.51)均显著增加(P值均<0.05).进一步检测了弹性蛋白酶12的基因表达,与健康对照组(1.30±0.10)相比,弹