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目的 探讨环氧合酶2(COX2)抑制剂塞来昔布对肺泡巨噬细胞凋亡、炎症反应及吞噬能力的影响.方法 四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测0.1μmol/L、1μmol/L、5μmol/L、10μmol/L、20μmol/L塞来昔布对大鼠肺泡巨噬细胞株NR8383的细胞毒性,选择合适的塞来昔布浓度.将NR8383细胞随机分为3组,即对照组、LPS组和LPS+塞来昔布组.对照组:细胞培养板加等体积磷酸盐缓冲液(PBS);LPS处理组:细胞用终浓度为1μg/ml的脂多糖(LPS)处理;LPS+塞来昔布组:10μmol/L的塞来昔布处理细胞1 h后,加1μg/ml的LPS处理细胞24 h.流式细胞术检测细胞凋亡率;Western blotting检测NF-κBp65、IκBα、Bax和Bcl-2蛋白表达;qRT-PCR检测炎症因子TNF-αmRNA表达;激光共聚焦技术检测巨噬细胞的吞噬能力.结果 0.1~10μmol/L塞来昔布处理对NR8383细胞无细胞毒性,20μmol/L塞来昔布处理可抑制NR8383细胞活力.LPS组与对照组比较,细胞凋亡率升高,NF-κBp65和Bax蛋白表达升高,IκBα和Bcl-2蛋白表达降低,TNF-αmRNA表达升高,细胞吞噬能力降低(P<0.05),LPS+塞来昔布组与LPS组比较,细胞凋亡率降低,NF-κBp65和Bax蛋白表达降低,IκBα和Bcl-2蛋白表达升高,TNF-αmRNA表达降低,细胞吞噬能力升高(P<0.05).结论 塞来昔布可通过下调NF-κB信号抑制LPS诱导的

作者:王莉;王小军;王青

来源:临床和实验医学杂志 2019 年 18卷 19期

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作者:
王莉;王小军;王青
来源:
临床和实验医学杂志 2019 年 18卷 19期
标签:
大鼠 肺泡巨噬细胞 COX2抑制剂 炎症反应 凋亡 NF-κB信号
目的 探讨环氧合酶2(COX2)抑制剂塞来昔布对肺泡巨噬细胞凋亡、炎症反应及吞噬能力的影响.方法 四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测0.1μmol/L、1μmol/L、5μmol/L、10μmol/L、20μmol/L塞来昔布对大鼠肺泡巨噬细胞株NR8383的细胞毒性,选择合适的塞来昔布浓度.将NR8383细胞随机分为3组,即对照组、LPS组和LPS+塞来昔布组.对照组:细胞培养板加等体积磷酸盐缓冲液(PBS);LPS处理组:细胞用终浓度为1μg/ml的脂多糖(LPS)处理;LPS+塞来昔布组:10μmol/L的塞来昔布处理细胞1 h后,加1μg/ml的LPS处理细胞24 h.流式细胞术检测细胞凋亡率;Western blotting检测NF-κBp65、IκBα、Bax和Bcl-2蛋白表达;qRT-PCR检测炎症因子TNF-αmRNA表达;激光共聚焦技术检测巨噬细胞的吞噬能力.结果 0.1~10μmol/L塞来昔布处理对NR8383细胞无细胞毒性,20μmol/L塞来昔布处理可抑制NR8383细胞活力.LPS组与对照组比较,细胞凋亡率升高,NF-κBp65和Bax蛋白表达升高,IκBα和Bcl-2蛋白表达降低,TNF-αmRNA表达升高,细胞吞噬能力降低(P<0.05),LPS+塞来昔布组与LPS组比较,细胞凋亡率降低,NF-κBp65和Bax蛋白表达降低,IκBα和Bcl-2蛋白表达升高,TNF-αmRNA表达降低,细胞吞噬能力升高(P<0.05).结论 塞来昔布可通过下调NF-κB信号抑制LPS诱导的