目的 研究G蛋白偶联雌激素膜受体(GPR30)-磷脂酰肌醇-3-激酶/丝苏氨酸蛋白激酶(PI3K/Akt)信号通路对乳腺癌细胞迁移能力的影响.方法 分别选取乳腺癌细胞系MDA-MB-231、MDA-MB-468、MDA-MB-453及MCF-7,采用免疫印迹法检测4种细胞中GPR30的表达情况,将表达量最高的细胞用于后期实验.通过细胞免疫荧光染色检测乳腺癌细胞中GPR30的定位情况;通过免疫印迹法检测不同剂量(0 ng、2 ng、6 ng、10 ng)GPR30激动剂E2作用乳腺癌细胞后磷酸化PI3K(p-PI3K)和磷酸化Akt(p-Akt)蛋白表达情况;采用划痕实验检测GPR30-PI3K/Akt信号通路活化对乳腺癌细胞迁移能力的影响.结果 GPR30在4种乳腺癌细胞系MDA-MB-231、MDA-MB-468、MDA-MB-453及MCF-7中的相对表达量分别为0.19±0.03、0.76±0.07、0.62±0.08、0.91±0.09,差异具有统计学意义(P<0.01).因MCF-7细胞中GPR30的表达量最高,故以MCF-7细胞为实验对象.经免疫荧光染色可知,GPR30高表达于乳腺癌MCF-7细胞的胞质和胞膜上.随着激动剂E2使用剂量的提高和刺激时间的延长,p-PI3K、p-Akt蛋白表达量均明显增高(P<0.05),具有时间和剂量依赖性.激动剂E2最佳使用剂量为10 mg/ml,最佳干预时间为10 min,经激动剂E2(10 mg/ml)刺激乳腺癌MCF-7细胞10 min后,p-PI3K蛋白表达量显著升高(P<0.05

作者：张勤；刘学良；王鹏；邵建强；白杰；张辉；王遵义

来源：临床和实验医学杂志 2020 年 19卷 5期