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目的 探讨microRNA20a通过核因子-κB信号通路影响肺炎模型幼鼠炎症反应和T细胞亚群分型的机制.方法 30只SPF级雄性BALB/c小鼠随机分为两组:肺炎组和健康组,每组各15只.肺炎模型组采用刺破鼻黏膜后,从鼻腔滴入50μl链球菌液法制备小鼠链球菌性肺炎模型;健康组刺破鼻黏膜后,从鼻腔滴入50μl生理盐水.将肺炎细胞分成4组:对照组、脂多糖(LSP)组、LPS+miR-20a组、LSP+miR-20a+PDTC组,分别用模拟对照物、脂多糖、mir-20a模拟物转染细胞,过表达miR-20A的细胞在37℃时用NF-κB抑制剂PDTC(100μg/L)处理30 min.用逆转录定量聚合酶链反应检测miR-20a的血清表达水平.用酶联免疫吸附(ELISA)法检测临床血清和组织细胞中白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子(TNF)α和C-反应蛋白(CRP)的浓度.用Western blotting法检测核因子(NF)-κBα(iκbα)和磷酸化p-NF-κB的蛋白表达水平.分析NF-κB抑制剂PDTC对miR-20a诱导的细胞炎症反应的影响.结果 肺炎组miR-20a的表达水平510.75±50.21,高于健康组202.36±39.58(P<0.05).肺炎组血清IL-6、TNF-α、CRP水平均高于健康组,差异有统计学意义(F<0.05).与对照组相比,LPS组的炎症因子IL-6、TNF-α 和CRP浓度增加(F<0.05),IκBα 和p-NF-κB蛋白表达水平升高(P<0.05).与LPS组相比,LPS+miR

作者:胡正权;孙欣娜;杨青

来源:临床和实验医学杂志 2020 年 19卷 8期

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作者:
胡正权;孙欣娜;杨青
来源:
临床和实验医学杂志 2020 年 19卷 8期
标签:
小鼠 肺炎 microRNA-20a 炎症因子 核因子-κB信号通路 脂多糖
目的 探讨microRNA20a通过核因子-κB信号通路影响肺炎模型幼鼠炎症反应和T细胞亚群分型的机制.方法 30只SPF级雄性BALB/c小鼠随机分为两组:肺炎组和健康组,每组各15只.肺炎模型组采用刺破鼻黏膜后,从鼻腔滴入50μl链球菌液法制备小鼠链球菌性肺炎模型;健康组刺破鼻黏膜后,从鼻腔滴入50μl生理盐水.将肺炎细胞分成4组:对照组、脂多糖(LSP)组、LPS+miR-20a组、LSP+miR-20a+PDTC组,分别用模拟对照物、脂多糖、mir-20a模拟物转染细胞,过表达miR-20A的细胞在37℃时用NF-κB抑制剂PDTC(100μg/L)处理30 min.用逆转录定量聚合酶链反应检测miR-20a的血清表达水平.用酶联免疫吸附(ELISA)法检测临床血清和组织细胞中白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子(TNF)α和C-反应蛋白(CRP)的浓度.用Western blotting法检测核因子(NF)-κBα(iκbα)和磷酸化p-NF-κB的蛋白表达水平.分析NF-κB抑制剂PDTC对miR-20a诱导的细胞炎症反应的影响.结果 肺炎组miR-20a的表达水平510.75±50.21,高于健康组202.36±39.58(P<0.05).肺炎组血清IL-6、TNF-α、CRP水平均高于健康组,差异有统计学意义(F<0.05).与对照组相比,LPS组的炎症因子IL-6、TNF-α 和CRP浓度增加(F<0.05),IκBα 和p-NF-κB蛋白表达水平升高(P<0.05).与LPS组相比,LPS+miR