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目的 探讨小鼠缺血性脑卒中发生后不同时间点病灶部位CD45+CD11b-免疫细胞浸润情况以及基因表达的动态变化.方法 将60只6~8周龄成年雄性C57鼠采用随机数字表法分为6组:假手术组(Sham组)和缺血性脑卒中后第1天(D1L组)、第3天组(D3L组)、第7天组(D7L组)、第14天组(D14L组)和第21天组(D21L组).Sham组小鼠给予缺血性脑卒中处理但不进行大脑中动脉结扎,缺血性脑卒中各组小鼠给予缺血性脑卒中手术处理.按上述时间点取病灶组织消化后,流式细胞术分选CD45+CD11b-免疫细胞,然后应用RNA-seq技术,对小鼠不同时间点分选的CD45+CD11b-免疫细胞进行基因表达谱测序、生物信息学分析以及细胞种类验证.结果 在缺血性脑卒中发生后,γδT淋巴细胞和天然杀伤性T淋巴细胞的数目逐渐上升,在D3达到高峰,然后逐渐下降趋于稳定;CD4 T淋巴细胞和CD8 T淋巴细胞数目逐渐上升,在D14达到高峰;调节性T淋巴细胞数目在D14出现明显的上升.结论 缺血性脑卒中发生后不同时间点,不同种类的CD45+CD11b-免疫细胞从外周循环系统浸润到病灶组织,早期主要以发挥先天免疫功能的CD45+CD11b-免疫细胞为主,中晚期主要以发挥适应性免疫的CD4 T淋巴细胞和CD8 T淋巴细胞为主.本研究首次运用转录组测序技术和流式细胞术系统阐述了缺血性脑卒中后不同时间点

作者:朱彦兵;王欢;潘雨花蕾;赵羽商;张成杰;王崧;张拥波

来源:临床和实验医学杂志 2022 年 21卷 14期

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作者:
朱彦兵;王欢;潘雨花蕾;赵羽商;张成杰;王崧;张拥波
来源:
临床和实验医学杂志 2022 年 21卷 14期
标签:
小鼠 缺血性脑卒中 流式细胞术 CD45+CD11b-免疫细胞 基因表达谱
目的 探讨小鼠缺血性脑卒中发生后不同时间点病灶部位CD45+CD11b-免疫细胞浸润情况以及基因表达的动态变化.方法 将60只6~8周龄成年雄性C57鼠采用随机数字表法分为6组:假手术组(Sham组)和缺血性脑卒中后第1天(D1L组)、第3天组(D3L组)、第7天组(D7L组)、第14天组(D14L组)和第21天组(D21L组).Sham组小鼠给予缺血性脑卒中处理但不进行大脑中动脉结扎,缺血性脑卒中各组小鼠给予缺血性脑卒中手术处理.按上述时间点取病灶组织消化后,流式细胞术分选CD45+CD11b-免疫细胞,然后应用RNA-seq技术,对小鼠不同时间点分选的CD45+CD11b-免疫细胞进行基因表达谱测序、生物信息学分析以及细胞种类验证.结果 在缺血性脑卒中发生后,γδT淋巴细胞和天然杀伤性T淋巴细胞的数目逐渐上升,在D3达到高峰,然后逐渐下降趋于稳定;CD4 T淋巴细胞和CD8 T淋巴细胞数目逐渐上升,在D14达到高峰;调节性T淋巴细胞数目在D14出现明显的上升.结论 缺血性脑卒中发生后不同时间点,不同种类的CD45+CD11b-免疫细胞从外周循环系统浸润到病灶组织,早期主要以发挥先天免疫功能的CD45+CD11b-免疫细胞为主,中晚期主要以发挥适应性免疫的CD4 T淋巴细胞和CD8 T淋巴细胞为主.本研究首次运用转录组测序技术和流式细胞术系统阐述了缺血性脑卒中后不同时间点