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目的 建立定量检测人血清可溶性补体受体1型(sCR1)双抗体ELISA夹心法.方法 用鼠抗人CD35单克隆抗体(mAb)包被反应板,以兔抗人sCR1抗体(PcAb)为夹心抗体,辣根过氧化物酶(HRP)标记的山羊抗兔IgG为检测抗体,纯化后的人sCR1蛋白为标准品,建立定量检测人血清sCR1双抗体夹心ELISA法,并检测50例体检健康者和32例肝硬化患者血清样本中sCR1水平.结果 建立的双抗体夹心ELISA法检测人血清sCR1的线性范围为15.6 ~ 250 ng/mL.低、高浓度批内变异系数(CV)分别为9.3%、7.1%;批间CV分别为11.2%和9.82%;回收率分别为89.5%和92.5%.50例健康人和32例肝硬化患者血清sCR1水平分别为(33.82±5.88)ng/mL和(152.99 ±9.51) ng/mL,两者比较有统计学差异(t=70.18,P<0.001).结论 成功建立了检测人血清sCR1的双抗体夹心ELISA法,重复性和准确性较好.初步发现肝硬化患者血清sCR1水平显著升高.

作者:周明武;刘亚利;徐立博;李琛琪;罗彦平;陈北方;王广兰

来源:临床检验杂志 2013 年 31卷 9期

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作者:
周明武;刘亚利;徐立博;李琛琪;罗彦平;陈北方;王广兰
来源:
临床检验杂志 2013 年 31卷 9期
标签:
酶联免疫吸附试验 双抗体夹心法 可溶性补体受体1型
目的 建立定量检测人血清可溶性补体受体1型(sCR1)双抗体ELISA夹心法.方法 用鼠抗人CD35单克隆抗体(mAb)包被反应板,以兔抗人sCR1抗体(PcAb)为夹心抗体,辣根过氧化物酶(HRP)标记的山羊抗兔IgG为检测抗体,纯化后的人sCR1蛋白为标准品,建立定量检测人血清sCR1双抗体夹心ELISA法,并检测50例体检健康者和32例肝硬化患者血清样本中sCR1水平.结果 建立的双抗体夹心ELISA法检测人血清sCR1的线性范围为15.6 ~ 250 ng/mL.低、高浓度批内变异系数(CV)分别为9.3%、7.1%;批间CV分别为11.2%和9.82%;回收率分别为89.5%和92.5%.50例健康人和32例肝硬化患者血清sCR1水平分别为(33.82±5.88)ng/mL和(152.99 ±9.51) ng/mL,两者比较有统计学差异(t=70.18,P<0.001).结论 成功建立了检测人血清sCR1的双抗体夹心ELISA法,重复性和准确性较好.初步发现肝硬化患者血清sCR1水平显著升高.