目的 筛选胆碱酯酶(ChE)的最佳测量条件.方法 选择5,5'-二硫双(2-硝基苯甲酸)法(DTNB)测量ChE的关键影响因子,用单因素分析法确定响应面分析法(RSM)的理想实验区域,用RSM的中央合成设计建立相应的反应面模型,获得影响因子响应值的关系方程.用Minitab 15软件进行RSM测量条件优化,筛选出ChE最佳测量条件并进行验证.结果 ChE测量的关键影响因子为缓冲液pH值(A)、丁酰硫代胆碱浓度(B)、DTNB浓度(C).RSM的理想实验区域为缓冲液pH值7.6～9.2;丁酰硫代胆碱浓度6.7 ～20.1 mmol/L;DTNB浓度0.2 ～ 0.4 mmol/L.各影响因子与响应值(Y)的关系方程为Y=8 476.13-73.29A +20.00B-4.56C-126.86A2 +32.85B2 +71.48C2-55.47AB-1.06AC-16.34BC.ChE的最佳测量条件为缓冲液pH值8.10;丁酰硫代胆碱浓度13.40 mmol/L; DTNB浓度0.29 mmoL/L,此条件下ChE催化活性为8 755 U/L,相当于理论最高酶活性的95％以上.结论 用RSM成功筛选出ChE最佳测量条件,建立了合理可行的ChE测量影响因子的RSM多因子分析模型.
作者：金仁玲；刘春龙；孙慧颖；胡滨；陈宝荣
来源：临床检验杂志 2014 年 32卷 3期
