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目的 建立可视化肺炎支原体环介导等温扩增(LAMP)检测体系,并对其敏感性和特异性进行验证,以期开发出适合各级医院和现场高通量检测的肺炎支原体试剂盒.方法 克隆肺炎支原体P1基因质粒,并以此为模板建立LAMP体系,优化肺炎支原体LAMP体系的各组分和反应参数,添加反应指示剂羟基萘酚蓝,用已知浓度的肺炎支原体P1质粒检测体系敏感性;以相近种类支原体和细菌检测体系特异性.结果 建立的可视化肺炎支原体LAMP体系能特异性检测肺炎支原体,检测限为2×102 copies/mL.结论 建立的可视化肺炎支原体LAMP检测体系可应用于人肺炎支原体检测,价格低廉,无需贵重仪器设备,操作简便,适合各级医院和现场高通量肺炎支原体检测.

作者:严春霞;闻人庆;陆伟宏;何国产

来源:临床检验杂志 2016 年 34卷 2期

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作者:
严春霞;闻人庆;陆伟宏;何国产
来源:
临床检验杂志 2016 年 34卷 2期
标签:
肺炎支原体 环介导等温扩增 可视化 羟基萘酚蓝 Mycoplasma pneumoniae (Mp) loop-mediated isothermal amplification (LAMP) visual hydroxynaphthol blue
目的 建立可视化肺炎支原体环介导等温扩增(LAMP)检测体系,并对其敏感性和特异性进行验证,以期开发出适合各级医院和现场高通量检测的肺炎支原体试剂盒.方法 克隆肺炎支原体P1基因质粒,并以此为模板建立LAMP体系,优化肺炎支原体LAMP体系的各组分和反应参数,添加反应指示剂羟基萘酚蓝,用已知浓度的肺炎支原体P1质粒检测体系敏感性;以相近种类支原体和细菌检测体系特异性.结果 建立的可视化肺炎支原体LAMP体系能特异性检测肺炎支原体,检测限为2×102 copies/mL.结论 建立的可视化肺炎支原体LAMP检测体系可应用于人肺炎支原体检测,价格低廉,无需贵重仪器设备,操作简便,适合各级医院和现场高通量肺炎支原体检测.