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目的 建立和鉴定外周血中红系祖细胞来源的诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cells,iPSCs).方法 从健康人外周血标本中分选红系祖细胞,将表达Oct4、Sox2、Lin28、L-Myc和Klf4转录因子的oriP/EBNAl附着体电转染红系祖细胞使其重编程获得iPSCs,并通过核型鉴定、碱性磷酸酶染色、RT-PCR反应、畸胎瘤形成实验及类胚体形成实验检测其干细胞多能性特性.结果 获得的iPSCs核型正常,碱性磷酸酶染色呈阳性,表达干细胞多能性基因Sox2、Oct4、Nanog和Klf4和Lin28,体内畸胎瘤形成实验可分化为内、中、外三胚层细胞,体外可形成类胚体.结论 成功建立外周血红系祖细胞来源具有多向分化潜能的iPSCs.

作者:梁淑贞;林茂;陈继冰;牛立志

来源:临床检验杂志 2016 年 34卷 8期

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作者:
梁淑贞;林茂;陈继冰;牛立志
来源:
临床检验杂志 2016 年 34卷 8期
标签:
红系祖细胞 转录因子 重编程 诱导多能干细胞 erythroid progenitor cells reprogramming vector reprogramming induced pluripotent stem cells
目的 建立和鉴定外周血中红系祖细胞来源的诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cells,iPSCs).方法 从健康人外周血标本中分选红系祖细胞,将表达Oct4、Sox2、Lin28、L-Myc和Klf4转录因子的oriP/EBNAl附着体电转染红系祖细胞使其重编程获得iPSCs,并通过核型鉴定、碱性磷酸酶染色、RT-PCR反应、畸胎瘤形成实验及类胚体形成实验检测其干细胞多能性特性.结果 获得的iPSCs核型正常,碱性磷酸酶染色呈阳性,表达干细胞多能性基因Sox2、Oct4、Nanog和Klf4和Lin28,体内畸胎瘤形成实验可分化为内、中、外三胚层细胞,体外可形成类胚体.结论 成功建立外周血红系祖细胞来源具有多向分化潜能的iPSCs.