目的 探讨4种核酸染料(EB、SYBR Green Ⅰ、Gold View和AO)在单细胞凝胶电泳(SCGE)中的染色特性,以分析用新型核酸荧光染料代替EB染料的可能性.方法 分离提取健康人外周血淋巴细胞,分别用0、20、40、60、80 μg/mL的H2O2进行处理,中性SCGE检测淋巴细胞DNA损伤情况;分别用EB、SYBR Green Ⅰ、Gold View和AO进行染色,荧光显微镜下观察并比较染色结果.分析尾部DNA百分含量(％Tail DNA)以比较组间差异.结果 SCGE结果表明,SYBR Green Ⅰ、Gold View和AO均能很好的反应实验结果,不同浓度中,1×～5×SYBR Green Ⅰ、2×～5 ×Gold View、2～5 μg/mL AO为最佳染色浓度范围.EB、SYBRGreen Ⅰ、Gold View和AO的回归系数分别为2.71、2.81、2.73、2.75,其染色效果较为一致,稳定性分析结果表明,3组细胞在48 h以内结果稳定,％ Tail DNA差异无统计学意义(P均＞0.05);SYBR Green Ⅰ、Gold View和AO实验室内精密度分别为6.92％、7.10％、8.25％,优于EB染色(8.35％);SYBR Green Ⅰ和Gold View重复性分别为3.07％、2.74％,优于EB染色(3.59％).结论 SYBR Green Ⅰ、Gold View和AO均可用于本实验染色,Gold View是更适合用于SCGE中替代EB的核酸荧光染料.

作者：杨丽艳；王竹；刘圆圆；徐克前

来源：临床检验杂志 2018 年 36卷 2期