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目的 探讨Hank's平衡盐溶液(Hank's balanced salt solution,HBSS)诱导的饥饿环境对肺癌细胞凋亡相关分子高迁移率组蛋白B1(HMGB1)表达的调控作用,并分析肺癌患者血清HMGB1水平在肺癌筛查中的应用价值.方法 设置HBSS处理组(使用HBSS更换完全培养基后继续培养)与对照组(使用完全培养基进行培养).利用HBSS处理Lewis肺癌细胞12 h后,采用分光光度法检测肺癌细胞中含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3(Caspase-3)活性.利用HBSS处理Lewis肺癌细胞0.5 h后,采用流式细胞术检测饥饿条件下肺癌细胞中氧化应激效应分子——活性氧(ROS)的表达水平.利用HBSS处理Lewis肺癌细胞0、4、8和12 h后,使用western blot检测细胞内HMGB1蛋白的表达水平.采用ELISA法检测肺癌患者(n=50)血清中HMGB1的表达水平,并分析其与血清肿瘤标志物水平间的相关性.结果 与对照组(0.14±0.01 U/L)相比,HBSS刺激12 h后,Lewis肺癌细胞中Caspase-3活性(0.24±0.01 U/L)明显升高(P<0.01).流式细胞术检测结果表明,与对照组(MFI:63.00±4.58)相比,HBSS刺激0.5 h后,Lewis肺癌细胞中ROS水平(MFI:293.00±9.54)上调(P<0.01).western blot结果显示,HBSS刺激0、4、8和12 h后,Lewis肺癌细胞中HMGB1蛋白的表达水平明显升高(P均<0.01).ELISA法结果显示,与健康人

作者:严留佳;郑齐锶;汪汀

来源:临床检验杂志 2019 年 37卷 8期

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作者:
严留佳;郑齐锶;汪汀
来源:
临床检验杂志 2019 年 37卷 8期
标签:
肺癌 饥饿环境 高迁移率组蛋白B1 凋亡 活性氧 含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3
目的 探讨Hank's平衡盐溶液(Hank's balanced salt solution,HBSS)诱导的饥饿环境对肺癌细胞凋亡相关分子高迁移率组蛋白B1(HMGB1)表达的调控作用,并分析肺癌患者血清HMGB1水平在肺癌筛查中的应用价值.方法 设置HBSS处理组(使用HBSS更换完全培养基后继续培养)与对照组(使用完全培养基进行培养).利用HBSS处理Lewis肺癌细胞12 h后,采用分光光度法检测肺癌细胞中含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3(Caspase-3)活性.利用HBSS处理Lewis肺癌细胞0.5 h后,采用流式细胞术检测饥饿条件下肺癌细胞中氧化应激效应分子——活性氧(ROS)的表达水平.利用HBSS处理Lewis肺癌细胞0、4、8和12 h后,使用western blot检测细胞内HMGB1蛋白的表达水平.采用ELISA法检测肺癌患者(n=50)血清中HMGB1的表达水平,并分析其与血清肿瘤标志物水平间的相关性.结果 与对照组(0.14±0.01 U/L)相比,HBSS刺激12 h后,Lewis肺癌细胞中Caspase-3活性(0.24±0.01 U/L)明显升高(P<0.01).流式细胞术检测结果表明,与对照组(MFI:63.00±4.58)相比,HBSS刺激0.5 h后,Lewis肺癌细胞中ROS水平(MFI:293.00±9.54)上调(P<0.01).western blot结果显示,HBSS刺激0、4、8和12 h后,Lewis肺癌细胞中HMGB1蛋白的表达水平明显升高(P均<0.01).ELISA法结果显示,与健康人