目的:克隆变形链球菌葡聚糖结合蛋白D(gbpD)基因,在大肠杆菌中表达并对重组蛋白进行初步纯化,为进一步的蛋白功能研究奠定基础.方法:体外培养变形链球菌UAl59菌株并以其基因组为模板,对gbpD基因编码区进行PCR扩增,连接pMD-18T载体并测序.随后将该片段克隆入原核表达载体PPRoEX HTb中,构建表达质粒pPROEX/gbpD,转化大肠杆菌DH5α并用IPTG诱导表达.表达产物经镍-次氮基三乙酸(Ni-NTA)柱进行亲和层析纯化.结果:成功克隆变形链球菌gbpD基因并在大肠杆菌中得到可溶性表达,经Ni-NTA柱纯化后获得纯度大于95
作者：赵红萍；吴补领；苏凌云；孙叶芳；王秦芳；刘艳丽；逄键梁
来源：临床口腔医学杂志 2005 年 21卷 10期
