目的:克隆人癌胚抗原(CEA)基因cDNA,构建pcDNA3.1-CEA真核表达载体.方法:采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术,从人结肠癌细胞组织克隆出CEA基因片段,通过基因重组技术将该基因片段重组于pcDNA3.1真核表达载体上,构建成pcDNA3.1-CEA重组质粒,分别用PCR扩增、酶切电泳分析及DNA测序的方法对重组DNA进行鉴定.结果:经PCR扩增,发现2.1 kb的目的基因条带、双酶切电泳分析可见2.1 kb的目的基因条带和5.4kb的载体条带、单酶切电泳分析可见0.9 kb的条带和6.6 kb的条带、DNA测序证实载体中的目的基因序列与CEA的cDNA序列完全相同.结论:本实验成功地克隆了CEA基因并构建了其真核表达质粒,为进一步研究CEA真核表达载体抗肿瘤的实验打下基础.
作者：张斌；王代友
来源：临床口腔医学杂志 2009 年 25卷 4期
