目的研究异基因造血干细胞移植(Allo HSCT)后感染人巨细胞病毒(HCMV)临床病毒株UL54基因的克隆与鉴定.方法从异基因造血干细胞移植后感染HCMV的患者体内分离出HCMV临床毒株,根据GenBank提供的实验室标准病毒株HCMV AD169 UL54基因DNA全序列及有关文献,从该临床毒株DNA中扩增分离出UL54基因片段,并克隆入pEGM3Z载体.对重组体pEGM3Z-UL54进行测序鉴定,并进行初步的序列分析.结果从临床病毒株中扩增出约3728bp的片段,克隆产物经琼脂糖凝胶电泳及直接测序鉴定,证实为HCMV UL54基因,其序列保守区域与GenBank报道AD169基本一致,但在第519、618、723、910、1188、1641、2070、2278、2279、2442、3140等11个位点发生碱基突变,涉及到编码氨基酸C304R、T760N、Y1047C、R1054K等位点发生改变,其中T760N为UL54保守区域改变. 结论成功克隆出Allo HSCT后感染野生型人巨细胞病毒的UL54基因,初步的序列分析证实其存在11个碱基发生突变,并导致编码产物4个氨基酸位点发生改变.
作者：田传军；李月琴；王波；叶铁真；张纯青；苏运贞；何华坤；周天鸿
来源：临床内科杂志 2005 年 22卷 4期
