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目的 观察色素上皮衍生因子(PEDF)对高糖诱导人肾小球系膜细胞(HMCs)转化生长因子-β1(TGF-β1)/Smad信号转导途径的影响.方法 体外培养HMCs并将其分为正常对照组(5.6 mmol/L葡萄糖)、渗透压对照组(5.6 mmol/L葡萄糖+24.4 mmol/L甘露醇)、高糖组(30 mmol/L葡萄糖)、干预1组(30 mmol/L葡萄糖+10 nmol/L PEDF)、干预2组(30 mmol/L葡萄糖+40 nmol/L PEDF)和干预3组(30 mmol/L葡萄糖+100 nmol/L PEDF),分别作用24 h后收集样本,采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测TGF-β1、纤维连接蛋白(FN)及Smad7 mRNA表达,Western blot检测Smad7蛋白的表达,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测TGF-β1、FN蛋白水平,免疫细胞化学检测p-Smad2/3蛋白的表达.结果 与正常对照组比较,高糖组TGF-β1、FN表达明显增加,Smad7表达明显减少(P<0.05或P<0.01),p-Smad2/3蛋白表达增加,而渗透压对照组与正常对照组比较无明显改变.与高糖组比较,PEDF干预组TGF-β1、FN表达减少,Smad7表达增加(P<0.05或P<0.01),p-Smad2/3蛋白表达呈下降趋势.结论 PEDF能抑制高糖诱导的TGF-β1、FN和p-Smad2/3蛋白过度表达及上调Smad7表达.PEDF可能通过影响TGF-β1/Smad信号转导途径达到抗纤维化的作用,延缓糖尿病肾病的进程.

作者:毛拓华;黄汉奇;洪练;李竞

来源:临床内科杂志 2018 年 35卷 7期

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作者:
毛拓华;黄汉奇;洪练;李竞
来源:
临床内科杂志 2018 年 35卷 7期
标签:
色素上皮衍生因子 转化生长因子-β1 纤维连接蛋白 P-Smad2/3 Smad7
目的 观察色素上皮衍生因子(PEDF)对高糖诱导人肾小球系膜细胞(HMCs)转化生长因子-β1(TGF-β1)/Smad信号转导途径的影响.方法 体外培养HMCs并将其分为正常对照组(5.6 mmol/L葡萄糖)、渗透压对照组(5.6 mmol/L葡萄糖+24.4 mmol/L甘露醇)、高糖组(30 mmol/L葡萄糖)、干预1组(30 mmol/L葡萄糖+10 nmol/L PEDF)、干预2组(30 mmol/L葡萄糖+40 nmol/L PEDF)和干预3组(30 mmol/L葡萄糖+100 nmol/L PEDF),分别作用24 h后收集样本,采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测TGF-β1、纤维连接蛋白(FN)及Smad7 mRNA表达,Western blot检测Smad7蛋白的表达,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测TGF-β1、FN蛋白水平,免疫细胞化学检测p-Smad2/3蛋白的表达.结果 与正常对照组比较,高糖组TGF-β1、FN表达明显增加,Smad7表达明显减少(P<0.05或P<0.01),p-Smad2/3蛋白表达增加,而渗透压对照组与正常对照组比较无明显改变.与高糖组比较,PEDF干预组TGF-β1、FN表达减少,Smad7表达增加(P<0.05或P<0.01),p-Smad2/3蛋白表达呈下降趋势.结论 PEDF能抑制高糖诱导的TGF-β1、FN和p-Smad2/3蛋白过度表达及上调Smad7表达.PEDF可能通过影响TGF-β1/Smad信号转导途径达到抗纤维化的作用,延缓糖尿病肾病的进程.