目的:构建人乳头瘤病毒(HPV)6b亚型L1的重组质粒,并了解其对小鼠的免疫原性.方法:将HPV6b的L1基因插入真核表达载体pcDNA3.1中,构建L1的重组质粒;鉴定后转染COS-7细胞,并用免疫印迹法进行表达分析;18只BALB/c雌性小鼠用作重组质粒的免疫原性检测.结果:重组质粒可被内切酶EcoRI和BamHI切开,测序发现插入片段与L1基因一致;转染24 h后十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)及免疫印迹出现了阳性条带;经pcDNA3.1-HPV6b L1免疫的小鼠可测到L1抗体(滴度为1:100),IL-4水平明显升高.结论:HPV6b L1的重组质粒构建成功,能在真核细胞内表达,并能有效激发小鼠产生体液免疫和细胞免疫.
作者:刘方;王家璧;左亚刚;刘跃华;马东来;朱铁山
来源:临床皮肤科杂志 2004 年 33卷 2期