目的:纯化和分析白癜风相关的黑素细胞膜抗原,为蛋白质微量测序及筛选、克隆黑素细胞膜抗原打下基础.方法:培养高纯度的正常人黑素细胞,活细胞ELISA法和蛋白免疫印迹法(Western b1ot)检测并筛选抗黑素细胞的高滴度IgG抗体血清,生物素标记可溶性黑素细胞膜抗原,加入筛选血清与蛋白A-琼脂糖凝胶(protein A-sepharose)进行免疫共沉淀,沉淀后的抗原抗体复合物行平极电泳及电转印,碱性磷酸酶标记的亲合素进行化学发光法检测及鉴定.结果:活细胞ELISA法和Western blot检测结果中共筛选了10例白癜风患者高滴度IgG血清,免疫沉淀、免疫印迹、化学发光法检测后发现10例患者均有阳性条带,其抗原相对分子质量为150 000、90 000、75 000、60 000.结论:白癜风患者血清中存在抗黑素细胞膜抗原的自身抗体,抗原相对分子质量主要为150 000、90 000、75000,通过免疫共沉淀初步纯化了150 000、90 000和75 000抗原.
作者：李强；卢涛；高天文；李春英
来源：临床皮肤科杂志 2004 年 33卷 10期
