目的:构建水痘-带状疱疹病毒(VZV)糖蛋白E(gE)原核表达系统的纯化方法,并鉴定目的蛋白.方法:将VZV gE基因片段克隆到原核表达载体pGEX-1λT,构建重组原核融合蛋白表达载体pGEX-VZVgE;用IPTG(异丙基-硫代-β-D-半乳糖苷)诱导融合蛋白在大肠杆菌中表达;利用蛋白回收试剂盒对表达产物进行纯化.并用免疫印迹法检测纯化产物的抗原性.结果:经双酶切及测序鉴定所得到的重组质粒即为含有目的片段的重组载体pGEX-VZVgE;在IPTG诱导下pGEX-VZVgE表达分子质量为98 ku的融合蛋白;纯化后的融合蛋白经凝血酶酶切后,得到分子质量约为72 ku的VZV gE,并用免疫印迹证明其具有良好的抗原性.结论:构建的VZV gE重组原核表达载体能表达重组蛋白,并建立了一套纯化VZV gE的方法;从而为VZVgE的应用研究打下基础.
作者：李福民；冉玉平；吴琦；李明；段德鉴；赵秀红；周光平
来源：临床皮肤科杂志 2005 年 34卷 3期
