目的:观察猿猴病毒40T(sv40T)抗原介导黑素细胞(melanocyte,MC)永生化对染色体核型、人白细胞抗原-DR(human letlcocyte antigen-DR,HLA-DR)和人端粒酶反转录酶(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)表达的影响.方法:利用SV40T抗原基因和真核表达载体PEGFP,经SofastTM阳离子聚合物转染至体外培养的第4代MC细胞,使其永生化,通过C418筛选,滤纸片法挑选单一克隆.对培养至第15代的永生化细胞进行染色体分析,免疫组化方法检测HLA-DR和hTERT蛋白的表达,反转录(RT)-PCR检测hTERT mRNA表达,以人黑素瘤A375细胞株为对照.结果:SV40T抗原介导的永生化黑素细胞具有正常的二倍体.HLA-DR和hTERT的表达未受影响,均为阴性,同时也未检测到hTERT mRNA的表达.结论:①转化的Mc染色体为正常核型、HLA-DR的表达不受体外长期传代培养和SV40T抗原的影响;②SV40T抗原不通过上调端粒酶反转录酶活性途径介导细胞永生化,同时也说明该转化细胞不易向恶性转化.
作者:常海;邓军;郝飞;杨希川;钟白玉;叶庆佾
来源:临床皮肤科杂志 2008 年 37卷 6期