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目的 探索下调孕烷X受体(PXR)表达对谷氨酸(GLU)模拟癫痫发作环境下小鼠脑微血管内皮细胞(mBMEC)P-糖蛋白(P-gp)表达和功能的影响.方法 体外培养小鼠脑微血管内皮bEnd.3细胞,分为不同浓度GLU处理组(以0 μmol/L、10 μmol/L、50 μmol/L、100 μmol/L GLU处理细胞30 min),GLU不同时间处理组(以100 μmol/L GLU处理细胞0 min、15 min、30 min);使用siRNA-PXR特异性抑制PXR表达,分为对照siRNA(NC siRNA)+GLU组、siRNA-PXR+GLU组.Western blotting检测细胞PXR和P-gp蛋白表达,细胞免疫荧光法检测细胞核内PXR蛋白表达,RT-qPCR检测细胞P-gp mRNA表达,罗丹明123(Rh123)细胞蓄积实验检测P-gp外排功能.结果 与空白组相比,50 μmol/L和100 μmol/L GLU组PXR和P-gp蛋白表达均增高(均P<0.05),尤以100 μmol/L组PXR和P-gp蛋白表达最明显.与空白组相比,15 min和30 min组PXR蛋白表达均增加(均P<0.05),30 min组 P-gp蛋白表达增加(P<0.05).与空白组相比,100 μmol/L GLU组胞核内PXR表达增加(P<0.05).与NC siRNA+GLU组相比,siRNA-PXR+GLU组PXR蛋白表达下调了37

作者:程永菲;余年;狄晴

来源:临床神经病学杂志 2018 年 31卷 6期

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作者:
程永菲;余年;狄晴
来源:
临床神经病学杂志 2018 年 31卷 6期
标签:
孕烷X受体 P-糖蛋白 谷氨酸 脑微血管内皮细胞 耐药性癫痫 pregnane X receptor P-glycoprotein glutamate brain microvascular endothelial cell Drug-resistant epilepsy
目的 探索下调孕烷X受体(PXR)表达对谷氨酸(GLU)模拟癫痫发作环境下小鼠脑微血管内皮细胞(mBMEC)P-糖蛋白(P-gp)表达和功能的影响.方法 体外培养小鼠脑微血管内皮bEnd.3细胞,分为不同浓度GLU处理组(以0 μmol/L、10 μmol/L、50 μmol/L、100 μmol/L GLU处理细胞30 min),GLU不同时间处理组(以100 μmol/L GLU处理细胞0 min、15 min、30 min);使用siRNA-PXR特异性抑制PXR表达,分为对照siRNA(NC siRNA)+GLU组、siRNA-PXR+GLU组.Western blotting检测细胞PXR和P-gp蛋白表达,细胞免疫荧光法检测细胞核内PXR蛋白表达,RT-qPCR检测细胞P-gp mRNA表达,罗丹明123(Rh123)细胞蓄积实验检测P-gp外排功能.结果 与空白组相比,50 μmol/L和100 μmol/L GLU组PXR和P-gp蛋白表达均增高(均P<0.05),尤以100 μmol/L组PXR和P-gp蛋白表达最明显.与空白组相比,15 min和30 min组PXR蛋白表达均增加(均P<0.05),30 min组 P-gp蛋白表达增加(P<0.05).与空白组相比,100 μmol/L GLU组胞核内PXR表达增加(P<0.05).与NC siRNA+GLU组相比,siRNA-PXR+GLU组PXR蛋白表达下调了37