目的：本实验通过研究不同浓度的同型半胱氨酸(homocysteine,HCY)对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)增殖和细胞周期的影响,分析可能的细胞损伤机制,探讨 HCY对细胞增殖影响的相关信号通路。同时对叶酸(folic acid,FA)对 HCY 的拮抗作用进行论证,为临床治疗提供理论依据。方法正常人脐静脉内皮细胞体外培养,随机分成6组：HCY低剂量组(1μmol/L),HCY 中剂量组(10μmol/L),HCY 高剂量组(100μmol/L),实验组(10μmol/L HCY+100μmol/L叶酸),叶酸组(100μmol/L)及阴性对照组。以 CCK-8法绘制相关组细胞生长曲线；用碘化丙啶单染法检测各组相关的细胞周期；Western-blotting检查周期相关蛋白表达。结果①CCK-8法绘制生长曲线显示,10μm HCY 吸光度明显抑制 HUVECs 的生长,而加入100μM FA后能改善这种抑制作用。②细胞周期分析显示：HCY 作用24 h 后,G0-G1期细胞百分比有明显增加,而 FA 能改善这种作用,表明 HCY 可能通过影响细胞周期的 R 点,使细胞停留在 G0-G1期；高浓度 HCY明显抑制了 S期,但没有明显规律；G2-M期随 HCY 浓度梯度增加,细胞百分比减少,而 FA能改善这种抑制作用。说明 HCY可能也影响了细胞的 M期的分裂过程。③周期相关蛋白表达结果显示 HCY 显著抑制 CDK 4

作者：罗敏虹；潘达亮；陈宝丽

来源：临床肾脏病杂志 2014 年 11期