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目的 研究普罗布考对氧化低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein,Ox-LDL)诱导的人肾近曲小管上皮细胞HK-2转分化的保护作用,并探讨凝集素样氧化低密度脂蛋白受体1(lectin-like oxidized low-density lipoprotein receptor-1,LOX-1)及氧化应激在其中的作用和相互关系.方法 采用不同浓度Ox-LDL(0~100μg/ml)孵育HK-2细胞,并予普罗布考(20μmol/L)和LOX-1抑制剂多聚肌苷酸(250μg/ml)干预.采用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法检测细胞增殖情况,用DCFH-DA法检测活性氧(reactive oxygen species,ROS)活性,生化比色法检测一氧化氮(nitric oxide,NO)浓度,Western blot检测E-钙粘素(cadherin)、α平滑肌动蛋白(α-smooth muscle aetin,α-SMA)、LOX-1、还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(Nicotinamide adenine dinucleotide 2-phosphate reduced tetrasodium salt,NADPH)氧化酶4(NOX4)表达.结果 12.5~200 μg/ml浓度范围内的Ox-LDL对HK-2细胞的增殖无明显影响,25~100μg/ml的Ox-LDL以浓度依赖方式促进HK-2细胞LOX-1、α-SMA蛋白表达上升,E-cadherin下降.而多聚肌苷酸、普罗布考能使LOX-1、a-SMA蛋白表达抑制,E-cadherin表达上调.50μg/ml的Ox-LDL能促进NOX4表达上调,ROS活性增加(451.5μg/ml比839.8μg

作者:朱冰冰;迟杨峰;王浩;刘育军;王云满;彭文

来源:临床肾脏病杂志 2015 年 15卷 10期

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作者:
朱冰冰;迟杨峰;王浩;刘育军;王云满;彭文
来源:
临床肾脏病杂志 2015 年 15卷 10期
标签:
肾小管上皮细胞-肌成纤维细胞转分化 人肾近曲小管上皮细胞 氧化低密度脂蛋白 凝集素样氧化低密度脂蛋白受体1 活性氧 Epithelial to mesenchymal transition Human renal proximal tubular epithelial cells Oxidized high-density lipoprotein Lectin-like oxidized low-density lipoprotein receptor-1 Reactive oxygen species
目的 研究普罗布考对氧化低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein,Ox-LDL)诱导的人肾近曲小管上皮细胞HK-2转分化的保护作用,并探讨凝集素样氧化低密度脂蛋白受体1(lectin-like oxidized low-density lipoprotein receptor-1,LOX-1)及氧化应激在其中的作用和相互关系.方法 采用不同浓度Ox-LDL(0~100μg/ml)孵育HK-2细胞,并予普罗布考(20μmol/L)和LOX-1抑制剂多聚肌苷酸(250μg/ml)干预.采用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法检测细胞增殖情况,用DCFH-DA法检测活性氧(reactive oxygen species,ROS)活性,生化比色法检测一氧化氮(nitric oxide,NO)浓度,Western blot检测E-钙粘素(cadherin)、α平滑肌动蛋白(α-smooth muscle aetin,α-SMA)、LOX-1、还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(Nicotinamide adenine dinucleotide 2-phosphate reduced tetrasodium salt,NADPH)氧化酶4(NOX4)表达.结果 12.5~200 μg/ml浓度范围内的Ox-LDL对HK-2细胞的增殖无明显影响,25~100μg/ml的Ox-LDL以浓度依赖方式促进HK-2细胞LOX-1、α-SMA蛋白表达上升,E-cadherin下降.而多聚肌苷酸、普罗布考能使LOX-1、a-SMA蛋白表达抑制,E-cadherin表达上调.50μg/ml的Ox-LDL能促进NOX4表达上调,ROS活性增加(451.5μg/ml比839.8μg