目的 探讨晚期糖基化终末产物(AGEs)诱导Wnt/β-catenin信号通路活化对足细胞自噬和迁移的影响.方法 将小鼠永生化肾足细胞系分为牛血清白蛋白组(100 mg/L BSA)、糖基化终末产物组(100 mg/L BSA-AGEs)和糖基化终末产物+DKK-1组(100 mg/L BSA-AGEs+100 DKK-1 mg/L),以未加干涉的正常足细胞为对照组.Western blot检测足细胞β-catenin蛋白、自噬膜蛋白微管相关蛋白轻链3-II(LC3-Ⅱ)以及自噬底物p62蛋白表达水平,免疫荧光观察足细胞自噬情况,ELISA检测细胞上清液中Nephrin蛋白含量,划痕试验检测足细胞迁移能力.用AGEs和AGEs+RAGE(糖基化终末产物受体)中和抗体处理足细胞系,Western blot检测足细胞 β-catenin蛋白的表达.结果 与对照组相比,AGEs组p-β-catenin、p62表达升高(P<0.05),LC3-Ⅱ 表达降低(P<0.05).AGEs+DKK-1组p-β-catenin、p62蛋白表达较AGEs组降低,LC3-Ⅱ 表达升高(P<0.05),但与对照组比较差异无显著性(P>0.05).BSA组各指标与对照组均无显著性差异(P>0.05).免疫荧光检测发现AGEs组足细胞中LC3荧光强度较对照组明显减弱,AGEs+DKK-1组较AGEs组LC3荧光强度增强,BSA组与对照组比较差异无显著性(P>0.05).AGEs组细胞培养上清中Nephrin含量较对照组明显降低(P<0.05),AGEs+DKK-1组较AGEs组升高(P<0.05)
作者:张利;刘建璟;孙林春
来源:临床肾脏病杂志 2018 年 18卷 12期