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目的 观察Bcl-2 家族蛋白在Ad.mda-7介导HepG2细胞凋亡中的变化,初步探讨Ad.mda-7 介导肝癌细胞的凋亡机制.方法 将携带人MDA-7/IL-24基因的腺病毒转染HepG2和L02,通过四甲基偶氮哩蓝染色法(MTT)及Hoechst染色观察MDA-7/IL-24对肝癌细胞HepG2和正常肝胚细胞L02的生长抑制和杀伤作用. Annexin V和PI 双染后流式细胞仪检测细胞的凋亡.蛋白免疫印迹法(Western blot)检测Bcl-2家族蛋白的变化.结果 Ad.mda-7能明显抑制肝癌细胞HepG2的生长,但对正常肝胚细胞L02没有明显抑制增殖作用.Hoechst染色和流式细胞仪提示Ad.mda-7能明显诱导肝癌细胞HepG2细胞的凋亡,但对正常肝胚细胞L02没有明显毒副作用.Western blot说明抑制凋亡的蛋白Bcl-2和Bcl-xl的表达在HepG2明显下降,在L02中则没有变化; 而促凋亡蛋白Bax在HepG2和L02都升高.结论 Ad.mda-7转染HepG2后,促凋亡(Bax)与抑凋亡蛋白(Bcl-2和Bcl-xl)的比率发生改变,进而发生凋亡.

作者:吉文伟;薛新波;郑建伟;陈堃;于愿;王从俊;胡回忆

来源:临床外科杂志 2008 年 16卷 3期

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作者:
吉文伟;薛新波;郑建伟;陈堃;于愿;王从俊;胡回忆
来源:
临床外科杂志 2008 年 16卷 3期
标签:
Ad.mda-7 HepG2 凋亡 Bcl-2家族蛋白
目的 观察Bcl-2 家族蛋白在Ad.mda-7介导HepG2细胞凋亡中的变化,初步探讨Ad.mda-7 介导肝癌细胞的凋亡机制.方法 将携带人MDA-7/IL-24基因的腺病毒转染HepG2和L02,通过四甲基偶氮哩蓝染色法(MTT)及Hoechst染色观察MDA-7/IL-24对肝癌细胞HepG2和正常肝胚细胞L02的生长抑制和杀伤作用. Annexin V和PI 双染后流式细胞仪检测细胞的凋亡.蛋白免疫印迹法(Western blot)检测Bcl-2家族蛋白的变化.结果 Ad.mda-7能明显抑制肝癌细胞HepG2的生长,但对正常肝胚细胞L02没有明显抑制增殖作用.Hoechst染色和流式细胞仪提示Ad.mda-7能明显诱导肝癌细胞HepG2细胞的凋亡,但对正常肝胚细胞L02没有明显毒副作用.Western blot说明抑制凋亡的蛋白Bcl-2和Bcl-xl的表达在HepG2明显下降,在L02中则没有变化; 而促凋亡蛋白Bax在HepG2和L02都升高.结论 Ad.mda-7转染HepG2后,促凋亡(Bax)与抑凋亡蛋白(Bcl-2和Bcl-xl)的比率发生改变,进而发生凋亡.