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目的 探讨在组织和细胞水平上Snail的表达与肾小管上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)及肾小管间质纤维化(tubulointerstitial fibrosis,TIF)的关系;观察转染Snail基因后人肾小管上皮细胞(HK-2)miRNA表达谱的变化,以深入阐明EMT机制中miRNA的重要性.方法 采用免疫组化法检测Snail及EMT相关蛋白vimentin、SMA、E-cadherin在40例IgA肾病患者肾穿刺组织中的表达.采用RT-PCR及Western blot法检测Snail、E-cadherin、vimentin、SMA在HK-2细胞正常对照组、空转染组、Snail基因转染组中的表达,进一步借助基因芯片筛选出差异表达的miRNA.结果 免疫组化结果显示,IgA肾病组织中Snail与vimentin及SMA蛋白的表达呈正相关,与E-cadherin蛋白的表达呈负相关,且TIF程度越高,Snail蛋白表达越强.RT-PCR及Western blot检测结果显示,与对照组相比,Snail转染组Snail、vimentin、SMA在基因和蛋白水平表达均升高,E-cadherin蛋白表达降低,差异具有统计学意义(P<0.05).基因芯片结果表明,Snail转染HK-2细胞后,筛选出5个明显差异表达的miRNA,预测出5 026个可能的潜在靶基因.结论 Snail表达与肾小管EMT及TIF关系密切,可作为新靶点,在EMT防治中起重要作用;差异表达的miRNAs可能参与Snail促进EMT及TIF过程的发生、

作者:李静;高慧敏;王弦;秦蓉

来源:临床与实验病理学杂志 2017 年 33卷 6期

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李静;高慧敏;王弦;秦蓉
来源:
临床与实验病理学杂志 2017 年 33卷 6期
标签:
肾病 肾小管上皮细胞 Snail 上皮-间质转化 免疫组织化学 miRNA 基因芯片 nephropathy renal tubular epithelial cells Snail epithelial-mesenchymal transition immunohistochemistry miRNA gene chip
目的 探讨在组织和细胞水平上Snail的表达与肾小管上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)及肾小管间质纤维化(tubulointerstitial fibrosis,TIF)的关系;观察转染Snail基因后人肾小管上皮细胞(HK-2)miRNA表达谱的变化,以深入阐明EMT机制中miRNA的重要性.方法 采用免疫组化法检测Snail及EMT相关蛋白vimentin、SMA、E-cadherin在40例IgA肾病患者肾穿刺组织中的表达.采用RT-PCR及Western blot法检测Snail、E-cadherin、vimentin、SMA在HK-2细胞正常对照组、空转染组、Snail基因转染组中的表达,进一步借助基因芯片筛选出差异表达的miRNA.结果 免疫组化结果显示,IgA肾病组织中Snail与vimentin及SMA蛋白的表达呈正相关,与E-cadherin蛋白的表达呈负相关,且TIF程度越高,Snail蛋白表达越强.RT-PCR及Western blot检测结果显示,与对照组相比,Snail转染组Snail、vimentin、SMA在基因和蛋白水平表达均升高,E-cadherin蛋白表达降低,差异具有统计学意义(P<0.05).基因芯片结果表明,Snail转染HK-2细胞后,筛选出5个明显差异表达的miRNA,预测出5 026个可能的潜在靶基因.结论 Snail表达与肾小管EMT及TIF关系密切,可作为新靶点,在EMT防治中起重要作用;差异表达的miRNAs可能参与Snail促进EMT及TIF过程的发生、