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目的 探讨肿瘤源性外泌体(tumor-derived exosomes,TDEs)通过miR-106a-Smad7调控间皮细胞间质性转化(mesotheli-al-to-mesenchymal transition,MMT)影响胃癌腹膜转移的机制.方法 人胃癌细胞系AGS分离外泌体,转染miR-106a mimic,与人腹膜间皮细胞HMrSV5共培养,EdU检测HMrSV5细胞增殖活力,Western blot法检测Smad7、E-cadherin、N-cadherin蛋白表达.给予TGF-β抑制剂GW788388,EdU检测HMrSV5细胞增殖变化,Western blot法检测SMA、Fibronectin表达.给予Smad7过表达质粒,Western blot法检测MMT相关蛋白表达,Transwell实验检测HMrSV5迁移能力.结果 AGS外泌体与HMrSV5共培养后,HMrSV5增殖活力下降,合并miR-106a mimic处理后,HMrSV5增殖活力进一步下降.Western blot显示,外泌体处理后Smad7表达下降,合并miR-106a mimic处理后,Smad7表达进一步下降;与此同时,E-cadherin表达下降,N-cadherin表达升高.TGF-β干预后,EdU检测显示HMrSV5细胞增殖活力下降,但给予GW788388后,HMrSV5细胞增殖活力有所恢复,Western blot显示TGF-β干预后SMA、Fibronectin表达升高,但给予GW788388后,SMA,Fibronectin表达逆转.给予Smad7过表达,Western blot显示SMA、Fibronectin表达下降,Transwell显示HMrSV5迁移能力下降(P<0.001).结论 胃癌

作者:朱萌;张宁;陶伟

来源:临床与实验病理学杂志 2021 年 37卷 4期

知识库介绍

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作者:
朱萌;张宁;陶伟
来源:
临床与实验病理学杂志 2021 年 37卷 4期
标签:
胃肿瘤 外泌体 间皮细胞 微小RNA Smad7 TGF-β
目的 探讨肿瘤源性外泌体(tumor-derived exosomes,TDEs)通过miR-106a-Smad7调控间皮细胞间质性转化(mesotheli-al-to-mesenchymal transition,MMT)影响胃癌腹膜转移的机制.方法 人胃癌细胞系AGS分离外泌体,转染miR-106a mimic,与人腹膜间皮细胞HMrSV5共培养,EdU检测HMrSV5细胞增殖活力,Western blot法检测Smad7、E-cadherin、N-cadherin蛋白表达.给予TGF-β抑制剂GW788388,EdU检测HMrSV5细胞增殖变化,Western blot法检测SMA、Fibronectin表达.给予Smad7过表达质粒,Western blot法检测MMT相关蛋白表达,Transwell实验检测HMrSV5迁移能力.结果 AGS外泌体与HMrSV5共培养后,HMrSV5增殖活力下降,合并miR-106a mimic处理后,HMrSV5增殖活力进一步下降.Western blot显示,外泌体处理后Smad7表达下降,合并miR-106a mimic处理后,Smad7表达进一步下降;与此同时,E-cadherin表达下降,N-cadherin表达升高.TGF-β干预后,EdU检测显示HMrSV5细胞增殖活力下降,但给予GW788388后,HMrSV5细胞增殖活力有所恢复,Western blot显示TGF-β干预后SMA、Fibronectin表达升高,但给予GW788388后,SMA,Fibronectin表达逆转.给予Smad7过表达,Western blot显示SMA、Fibronectin表达下降,Transwell显示HMrSV5迁移能力下降(P<0.001).结论 胃癌