目的:探讨microRNA?223( miR?223)在非小细胞肺癌( NSCLC) A549/DDP细胞对顺铂( DDP )耐药性方面的影响及可能机制。方法采用实时荧光定量PCR( qRT?PCR)检测DDP耐药肺腺癌细胞株A549/DDP及其亲本细胞株A549中miR?223的水平,将A549/DDP细胞分为3组:对照组、空转染组(转染无关序列)和抑制组(转染miR?223 inhibitor),于转染24、48、72及96 h后分别采用qRT?PCR和CCK?8法检测转染效果及细胞增殖情况,CCK?8法评价转染后A549/DDP 细胞对DDP的药物敏感性变化,采用流式细胞术检测转染48 h后的细胞凋亡和细胞周期情况,Western blotting检测转染48 h后耐药基因蛋白P?糖蛋白(P?gp)、多药耐药相关蛋白1(MRP1)及肺耐药相关蛋白(LRP)的表达。结果 A549/DDP细胞中的miR?223水平较高,为A549细胞的(7?14±0?26)倍(P<0?05);抑制组转染后的miR?223水平降低,转染96 h后的miR?223水平分别降至对照组的(67?15±2?84)%和空转染组的(65?80±3?47)%,差异均有统计学意义(P<0?05);与对照组相比,抑制组转染后的增殖抑制率、凋亡率及G0/G1期细胞比例均升高,而S和G2/M期细胞比例及3种耐药基因蛋白水平均降低,以上差异均有统计学意义(P<0?05)。 DDP对抑制组细胞的半数抑制浓度
作者:胡敏;魏晓霞;邹杰;崔发财;庞晓辉
来源:临床肿瘤学杂志 2015 年 5期