目的：探讨miR?26a／b调控p53／MDM2通路对胃癌细胞凋亡的影响。方法实时荧光定量PCR检测胃癌细胞系MGC803、MKN?45和MKN?28中miR?26a／b的表达水平，荧光素酶报告系统分析miR?26a／b与MDM23’非翻译区（3’ UTR）的结合情况；将化学合成miR?26a／b前体分子mimics和无关序列转染胃癌细胞MKN?45，化学合成miR?26a／b inhibitor转染胃上皮细胞GES?1后，Western blotting检测MDM2、p53及其下游分子p21和Bcl?2的表达，MTT法检测转染24、48、72和96 h的细胞增殖情况；通过AnnexinⅤ／PI双染检测miR?26a／b对MKN?45细胞凋亡情况。结果与永生化胃上皮细胞GES?1相比，miR?26a／b在肿瘤细胞系MGC803、MKN?45和MKN?28中的表达均下调，在MKN?45中表达水平最低；荧光素酶活性检测显示，miR?26a／b过表达抑制MDM23’ UTR报告载体（ Wild）的荧光素酶活性，而对3’ UTR突变型报告载体（ Mutation）荧光素酶活性无明显影响。 miR?26a／b抑制MKN?45细胞中MDM2表达并增强p53及下游分子表达，而在GES?1细胞中抑制miR?26a／b可以增强MDM2表达，降低p53及下游分子表达。 MTT结果显示，miR?26a／b抑制MKN?45细胞的增殖，miR?26a／b in?hibitor则明显促进GES?1细胞的增殖。通过AnnexinⅤ／PI检测细胞凋亡发现，miR?26a／b过表达

作者：叶劲军；周国仁；张治；解鹏；陆建伟；孙磊

来源：临床肿瘤学杂志 2015 年 11期