目的：探讨小干扰RNA（ siRNA）靶向抑制去泛素化酶3（ Dub3）基因表达对人鼻咽癌CNE?2细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响。方法优化siRNA转染条件，将2条靶向抑制Dub3基因的siRNA载体片段（ siRNA?1、siRNA?2）分别高效转染人鼻咽癌CNE?2细胞，同时设转染无义序列的空转染组及无任何处理的对照组。分别于转染24、48、72、96 h后采用实时定量PCR（ qPCR）检测Dub3表达水平以筛选抑制率高的感染载体用于后续试验。噻唑蓝法检测各组转染24、48、72、96 h后的增殖抑制率，流式细胞术检测各组转染48、96 h后的细胞凋亡和细胞周期情况，采用Western blotting检测各组转染96 h后细胞分裂周期蛋白25A（ Cdc25A）的表达情况。结果转染组的Dub3 mRNA水平均低于空转染组和对照组（ P＜0?05），且选择干扰效率高的siRNA?1载体进行功能学研究；与其余两组相比，抑制组转染后的增殖抑制率、凋亡率及caspase?3活化率均升高，且G0／G1期细胞比例升高，但S期和G2／M期细胞比例均降低，以上差异均有统计学意义（ P＜0?05）；抑制组转染后的Cdc25A 水平降低，与空载体组和对照组的差异有统计学意义（ P＜0?05）。空载体组和对照组以上指标的差异均无统计学意义（ P＞0?05）。结论通过siRNA抑制Dub3基因表达可抑制鼻咽癌细胞的
作者：崔巍；丁振；谷振芳；王军业
来源：临床肿瘤学杂志 2015 年 11期
