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目的 探讨非小细胞肺癌(NSCLC)中Neuritin的异常表达对肺血管内皮细胞的生物学作用及其作用机制.方法 选择2017年9月至12月新疆维吾尔自治区人民医院NSCLC患者手术切除的癌组织5~10例,提取原代人NSCLC血管内皮细胞(NSCLC-VECs),原代培养经病理确诊的NSCLC患者NSCLC-VECs细胞,选择CD34及FactorⅧ经免疫组化鉴定.利用荧光定量PCR(QPCR)及Western-blotting检测NSCLC-VECs及人肺微血管内皮细胞株(HPMECs)中Neuritin的表达水平.构建过表达/敲低Neuritin的NSCLC-VECs、HPMEC细胞系及阴性对照组,MTT、细胞划痕、Transwell小室、流式细胞术分别检测转染干扰/过表达Neuritin对细胞增殖及转移能力、细胞周期、细胞凋亡的影响;扫描电镜观察转染后细胞形态的改变.结果 NSCLC-VECs细胞中的Neuritin表达显著高于HPMEC细胞(P <0.01).过表达Neuritin后HPMEC和NSCLC-VECs细胞内Notch1、VEGFR蛋白和mRNA表达均显著升高(P <0.01);细胞体外增殖、划痕愈合及体外迁移能力较阴性对照组显著增强(P <0.05);电镜下观察细胞表面伪足明显,细胞间粘连增加;同时,过表达Neuritin促进了HPMEC和NSCLC-VECs细胞周期进程,并抑制细胞凋亡(P <0.001).反之,干扰HPMEC和NSCLC-VECs细胞内Neuritin表达后,胞内Notch1、VEGFR蛋白和mRNA表达均

作者:张建庆;章恒;王珍;赵辉

来源:临床肿瘤学杂志 2019 年 24卷 1期

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作者:
张建庆;章恒;王珍;赵辉
来源:
临床肿瘤学杂志 2019 年 24卷 1期
标签:
非小细胞肺癌(NSCLC) Neuritin Notch1 血管内皮生长因子(VEGF) Non-small cell lung cancer (NSCLC) Neuritin Notch1 Vascular endothelial growth factor (VEGF)
目的 探讨非小细胞肺癌(NSCLC)中Neuritin的异常表达对肺血管内皮细胞的生物学作用及其作用机制.方法 选择2017年9月至12月新疆维吾尔自治区人民医院NSCLC患者手术切除的癌组织5~10例,提取原代人NSCLC血管内皮细胞(NSCLC-VECs),原代培养经病理确诊的NSCLC患者NSCLC-VECs细胞,选择CD34及FactorⅧ经免疫组化鉴定.利用荧光定量PCR(QPCR)及Western-blotting检测NSCLC-VECs及人肺微血管内皮细胞株(HPMECs)中Neuritin的表达水平.构建过表达/敲低Neuritin的NSCLC-VECs、HPMEC细胞系及阴性对照组,MTT、细胞划痕、Transwell小室、流式细胞术分别检测转染干扰/过表达Neuritin对细胞增殖及转移能力、细胞周期、细胞凋亡的影响;扫描电镜观察转染后细胞形态的改变.结果 NSCLC-VECs细胞中的Neuritin表达显著高于HPMEC细胞(P <0.01).过表达Neuritin后HPMEC和NSCLC-VECs细胞内Notch1、VEGFR蛋白和mRNA表达均显著升高(P <0.01);细胞体外增殖、划痕愈合及体外迁移能力较阴性对照组显著增强(P <0.05);电镜下观察细胞表面伪足明显,细胞间粘连增加;同时,过表达Neuritin促进了HPMEC和NSCLC-VECs细胞周期进程,并抑制细胞凋亡(P <0.001).反之,干扰HPMEC和NSCLC-VECs细胞内Neuritin表达后,胞内Notch1、VEGFR蛋白和mRNA表达均