目的 探讨微小RNA-18a-3p(miR-18a-3p)对肝细胞癌下调蛋白1(HEPN1)的靶向调控作用及对骨肉瘤(OS)细胞侵袭迁移的影响.方法 从美国国家生物技术信息中心(NCBI)的GEO数据库中下载基因表达谱OS样本数据集GSE65071的series matrix数据,分析OS患者和健康对照的血浆miR-18a-3p水平;采用实时定量PCR检测OS细胞MG63和成骨细胞hFOB 1.19的miR-18a-3p和HEPN1 mRNA水平,Western blotting检测HEPN1蛋白水平;脂质体介导miR-18a-3p抑制物转染MG63细胞(Inhibitor组),同时设NC组(转染阴性对照序列)和对照组(仅予脂质体处理而未行转染),活细胞计数(CCK-8)法、划痕实验和Transwell小室实验检测细胞活力、划痕愈合率和穿膜细胞数以评估增殖和迁移侵袭能力,构建pmir-GLO载体并借助双荧光素酶报告检测系统验证miR-18a-3p与HEPN1间的靶向关系.结果 GSE65071数据集显示,20例OS患者的血浆miR-18a-3p水平为7.262±0.494,高于15例健康对照的6.005±0.081(P<0.05).与hFOB 1.19细胞相比,MG63细胞的miR-18a-3p水平升高至3.361±0.257,而HEPN1 mRNA水平降低至0.571±0.068,差异有统计学意义(P<0.05);与对照组和NC组相比,Inhibitor组的miR-18a-3p水平降低,而HEPN1 mRNA和蛋白水平升高(P<0.05).双荧光素酶报告基因实验结果 显示,miR-18a-3

作者：李涛；李娜；李佳；王磊

来源：临床肿瘤学杂志 2020 年 25卷 5期