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目的 观察肿瘤相关巨噬细胞(tumor-associated macrophages,TAMs)对乳腺癌MCF-7细胞侵袭迁移能力的影响,并初步探索其机制.方法 选取人单核细胞系THP-1,体外经佛波酯(PMA)、人白细胞介素-4(IL-4)诱导获得TAMs细胞模型;通过流式细胞术(FCM)检测TAMs表面标记分子CD206表达水平;MCF-7细胞与TAMs共培养后,光学倒置显微镜观察细胞形态;利用Transwell小室分别检测MCF-7细胞的侵袭和迁移能力;蛋白印记法(Western blotting)检测E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、闭合蛋白(Occludin)及波形纤维蛋白(Vimentin)的表达;采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定细胞培养上清中转化生长因子-β(TGF-β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和血管内皮生长因子(VEGF)的浓度.结果 与TAMs共培养后的MCF-7细胞伪足增多,细胞排列更松散.通过FCM检测到TAMs表面标记物CD206显著表达.Transwell实验结果显示,与TAMs共培养后的MCF-7细胞迁移能力增强,对照组穿过Transwell小室细胞数为(54±2)个,实验组为(110±6)个,差异有统计学意义(P<0.001);其侵袭能力显著增强,对照组穿透基质膜的细胞数为(41±1)个,实验组为(77±4)个,差异亦有统计学意义(P<0.001).Western blotting检测结果显示,MCF-7细胞与TAMs共培养后,E-cadherin、Occludin蛋

作者:李旭;黄新宇;赵琳;吴芳;王玉珍;廖子君;安改丽

来源:临床肿瘤学杂志 2022 年 27卷 1期

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作者:
李旭;黄新宇;赵琳;吴芳;王玉珍;廖子君;安改丽
来源:
临床肿瘤学杂志 2022 年 27卷 1期
标签:
乳腺癌;肿瘤相关巨噬细胞;侵袭迁移;上皮-间质转化
目的 观察肿瘤相关巨噬细胞(tumor-associated macrophages,TAMs)对乳腺癌MCF-7细胞侵袭迁移能力的影响,并初步探索其机制.方法 选取人单核细胞系THP-1,体外经佛波酯(PMA)、人白细胞介素-4(IL-4)诱导获得TAMs细胞模型;通过流式细胞术(FCM)检测TAMs表面标记分子CD206表达水平;MCF-7细胞与TAMs共培养后,光学倒置显微镜观察细胞形态;利用Transwell小室分别检测MCF-7细胞的侵袭和迁移能力;蛋白印记法(Western blotting)检测E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、闭合蛋白(Occludin)及波形纤维蛋白(Vimentin)的表达;采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定细胞培养上清中转化生长因子-β(TGF-β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和血管内皮生长因子(VEGF)的浓度.结果 与TAMs共培养后的MCF-7细胞伪足增多,细胞排列更松散.通过FCM检测到TAMs表面标记物CD206显著表达.Transwell实验结果显示,与TAMs共培养后的MCF-7细胞迁移能力增强,对照组穿过Transwell小室细胞数为(54±2)个,实验组为(110±6)个,差异有统计学意义(P<0.001);其侵袭能力显著增强,对照组穿透基质膜的细胞数为(41±1)个,实验组为(77±4)个,差异亦有统计学意义(P<0.001).Western blotting检测结果显示,MCF-7细胞与TAMs共培养后,E-cadherin、Occludin蛋