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[目的]了解氢醌(HQ)对人骨髓间充质干细胞蛋白表达谱的影响,筛选HQ骨髓毒性作用的靶蛋白.[方法]体外分离并培养人的骨髓间充质干细胞至第3代,随即将细胞分为实验组和对照组.实验组用5×10-5mol/L的HQ染毒24 h;对照组加入相同浓度的磷酸缓冲液处理24 h.染毒完毕后即刻抽提两组细胞的总蛋白,然后利用双向凝胶电泳技术和LC-Qq-TOF质谱技术进行蛋白表达谱分析,找到可能的HQ骨髓毒性靶蛋白.[结果]在3次重复实验中,对照组与HQ处理组相比较,均有约20个差异蛋白点.其中3次中有11个重复的差异蛋白点,质谱分析鉴定出膜联蛋白-Ⅱ、甲酰-谷胱苷肽水解酶、尿苷二磷酸葡萄糖脱氢酶和醛缩酶-A 4个蛋白点.[结论]HQ可诱导膜联蛋白-Ⅱ、醛缩酶-A和尿苷二磷酸葡萄糖脱氢酶表达下调及甲酰-谷胱苷肽水解酶表达的上调.

来源:环境与职业医学 2009 年 26卷 5期

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环境与职业医学 2009 年 26卷 5期
标签:
氢醌 骨髓间充质干细胞 双向凝胶电泳 质谱 蛋白质组学
[目的]了解氢醌(HQ)对人骨髓间充质干细胞蛋白表达谱的影响,筛选HQ骨髓毒性作用的靶蛋白.[方法]体外分离并培养人的骨髓间充质干细胞至第3代,随即将细胞分为实验组和对照组.实验组用5×10-5mol/L的HQ染毒24 h;对照组加入相同浓度的磷酸缓冲液处理24 h.染毒完毕后即刻抽提两组细胞的总蛋白,然后利用双向凝胶电泳技术和LC-Qq-TOF质谱技术进行蛋白表达谱分析,找到可能的HQ骨髓毒性靶蛋白.[结果]在3次重复实验中,对照组与HQ处理组相比较,均有约20个差异蛋白点.其中3次中有11个重复的差异蛋白点,质谱分析鉴定出膜联蛋白-Ⅱ、甲酰-谷胱苷肽水解酶、尿苷二磷酸葡萄糖脱氢酶和醛缩酶-A 4个蛋白点.[结论]HQ可诱导膜联蛋白-Ⅱ、醛缩酶-A和尿苷二磷酸葡萄糖脱氢酶表达下调及甲酰-谷胱苷肽水解酶表达的上调.