[背景]矽肺发病机制未明且没有特效治疗方法,长链非编码RNA(lncRNA)在矽肺纤维化进程中或可发挥作用.[目的]探讨lncRNA MRAK050699对SiO2粉尘诱导大鼠肺泡II型上皮细胞(RLE-6TN细胞)发生上皮-间质转换(EMT)过程的影响.[方法]建立大鼠肺泡巨噬细胞(NR8383细胞)与RLE-6TN细胞共培养体外矽肺模型,分为正常组、模型组、敲减对照组、敲减组.采用CCK8法检测NR8383细胞在10、20、40、80、160、320μg·cm-2 SiO2粉尘刺激下的活力,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测在0、20、40、80μg·cm-2粉尘刺激下的转化生长因子-β(TGF-β)含量,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测MRAK050699敲减效率.取四个6孔板,在前两个6孔板中正常培养RLE-6TN细胞24 h,后两个6孔板分别培养转染阴性对照病毒的RLE-6TN细胞24 h,和转染敲减MRAK050699病毒的RLE-6TN细胞24 h;同时在另四个6孔板中,插入Transwell小室,正常培养NR8383细胞24 h.NR8383细胞与RLE-6TN细胞铺板比例为1:2,之后将Transwell小室连同NR8383细胞一同转入RLE-6TN细胞的6孔板中,向后三组共培养体系的Transwell小室中加入40μg·cm-2 SiO2粉尘悬液150μL后,四组同时继续培养24 h,取Transwell小室下室的RLE-6TN细胞置于显微镜下观察,使用Western blotting及RT-qPCR法检测E-cadheri

作者：高芳瑜；刘煊；田娣；陈溪渊；田雪艳；焦子铭；侯朋邑；王发选

来源：环境与职业医学 2021 年 38卷 3期