[背景]砷可以通过触发氧化应激对机体产生毒作用,这一过程伴随表观遗传修饰的改变.[目的]探讨亚砷酸钠(NaAsO2)引起人胚肺成纤维细胞(HELF)氧化应激过程中的N6-甲基腺苷(m6A)修饰变化.[方法]使用不同浓度的NaAsO2(0、2.5、5、10、20μmol·L–1)处理HELF细胞48 h,采用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTS)法检测细胞活力;使用相应试剂盒检测氧化应激因子总超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性以及丙二醛(MDA)的含量;酶联免疫吸附法检测细胞总RNA中的m6A甲基化水平;实时荧光定量PCR法检测m6A修饰酶:甲基转移酶样3(METTL3)、甲基转移酶样14(METTL14)、肾母细胞瘤1关联蛋白(WTAP)、脂肪量与肥胖相关蛋白(FTO)、Fe(II)和α-KG依赖的双加氧酶AlkB家族成员5(ALKBH5)、YTH结构域蛋白2(YTHDC2)、YTH结构域家族蛋白2(YTHDF2)、YTH结构域家族蛋白3(YTHDF3)的mRNA表达情况;Western blotting法检测METTL3、FTO、YTHDC2、YTHDF3、核因子E2相关因子2(NRF2)的蛋白表达情况.采用RNA甲基化免疫共沉淀-实时荧光定量PCR法(MeRIP-qPCR)检测NRF2 mRNA中m6A的富集情况.[结果]使用0、2.5、5、10、20μmol·L?1 NaAsO2处理细胞后,MTS实验结果显示,相较于对照组,20μmol·L?1组的细胞活力降低至84
作者:郑婧婧;赵钊;张佳靖;王素华;卜宁;史雪敏;赵宇航
来源:环境与职业医学 2022 年 39卷 5期