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目的 探讨miR-761对卵巢癌SKOV3细胞增殖的影响以及相关机制.方法 采用Lipofectamine 2000将miR-761过表达和沉默质粒载体分别转染卵巢癌SKOV3细胞后,采用Real-Time PCR验证其转染效率;采用CCK8法检测miR-761对卵巢癌SKOV3细胞增殖的影响;采用Real-Time PCR检测卵巢癌SKOV3细胞中CRKL mRNA表达变化.采用双荧光素酶报告基因验证miR-761和CRKL的存在靶向结合并明确其结合位点.将CRKL(+)和CRKL(-)慢病毒载体分别转染至卵巢癌SKOV3细胞;采用CCK8法检测CRKL对卵巢癌SKOV3细胞增殖的影响.将CRKL(+)和CRKL(-)质粒分别转染至已经建立的miR-761过表达和沉默细胞,采用CCK8检测卵巢癌SKOV3细胞增殖变化.结果 与对照组比较,miR-761过表达显著抑制了卵巢癌SKOV3细胞的增殖,极大降低了CRKL在SKOV3细胞中的mRNA和蛋白水平;miR-761和CRKL存在靶向结合,并明确了其结合位点;CRKL过表达显著增强了卵巢癌SKOV3细胞增殖能力;CRKL过表达有效阻断了miR-761抑制SKOV3细胞增殖的作用.结论 miR-761能够通过靶向下调CRKL,抑制卵巢癌SKOV3细胞增殖.

作者:李经纬;王诗卓;赵福杰

来源:临床军医杂志 2016 年 44卷 6期

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作者:
李经纬;王诗卓;赵福杰
来源:
临床军医杂志 2016 年 44卷 6期
标签:
miR-761 CRKL 增殖 卵巢癌SKOV3细胞 miR-761 CRKL Proliferation SKOV3 ovarian cancer cells
目的 探讨miR-761对卵巢癌SKOV3细胞增殖的影响以及相关机制.方法 采用Lipofectamine 2000将miR-761过表达和沉默质粒载体分别转染卵巢癌SKOV3细胞后,采用Real-Time PCR验证其转染效率;采用CCK8法检测miR-761对卵巢癌SKOV3细胞增殖的影响;采用Real-Time PCR检测卵巢癌SKOV3细胞中CRKL mRNA表达变化.采用双荧光素酶报告基因验证miR-761和CRKL的存在靶向结合并明确其结合位点.将CRKL(+)和CRKL(-)慢病毒载体分别转染至卵巢癌SKOV3细胞;采用CCK8法检测CRKL对卵巢癌SKOV3细胞增殖的影响.将CRKL(+)和CRKL(-)质粒分别转染至已经建立的miR-761过表达和沉默细胞,采用CCK8检测卵巢癌SKOV3细胞增殖变化.结果 与对照组比较,miR-761过表达显著抑制了卵巢癌SKOV3细胞的增殖,极大降低了CRKL在SKOV3细胞中的mRNA和蛋白水平;miR-761和CRKL存在靶向结合,并明确了其结合位点;CRKL过表达显著增强了卵巢癌SKOV3细胞增殖能力;CRKL过表达有效阻断了miR-761抑制SKOV3细胞增殖的作用.结论 miR-761能够通过靶向下调CRKL,抑制卵巢癌SKOV3细胞增殖.